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10种西部核桃仁营养分析及核桃青皮多酚对乳腺癌细胞231的凋亡作用研究

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核桃属于胡桃科胡桃属植物，是我国分布范围最广、栽培历史最悠久的干果树种。核桃仁营养丰富，具有重要的食用价值和营养保健功能。我国是核桃生产大国，资源丰富。目前国内对核桃营养成分尚缺乏系统分析和评价，对其废弃副产品果皮的功能更缺乏了解，影响了其深加工和新产品开发。因此，本研究对来自新疆、四川和云南的10个品种的核桃仁进行了脂肪、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿物质等营养成分的分析评价，对37种组分作了主成分分析;同时进行了核桃青皮多酚提取物对肿瘤细胞的凋亡作用研究。
　　（一）10种核桃外观品质与果仁营养成分综合分析评价
　　对来自新疆的“温81”、“温185”、“新萃丰”、“新早丰”、“新新2”、“扎343”、“铁核桃”，来自四川的“野核桃”、“青川纸皮野生核桃”，以及来自云南的“泡核桃”等10个品种分别进行了核桃外观品质评价。结果表明，10个品种核桃果形基本一致，外壳呈自然黄白色，种仁饱满，色黄白，“温81”、“温185”、“新新2”易取整仁，“泡核桃”、“扎343”、“新早丰”、“新萃丰”易取半仁，“青川纸皮”、“铁核桃”易取四分之一仁。可见，新疆核桃与其他产地的核桃相比，更易取仁，适合手剥，方便食用。“青川纸皮野生核桃”、“铁核桃”取仁较难，不适合手剥食用。“温185”、“温81”的出仁率较高，达60％以上，分别为64.71％、62.46％，“新萃丰”、“新早丰”的出仁率较低，分别为48.77％、46.65％。
　　对核桃仁含有的脂肪、蛋白质、多酚、水分、灰分、氨基酸、脂肪酸、微量元素等化学成分进行分析比较，结果显示，所有核桃仁含脂肪65％左右，脂肪酸由棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚麻酸等五种脂肪酸组成，其中多不饱和脂肪酸占脂肪酸量的71.24％，亚油酸(ω-6)/α-亚麻酸(ω-3)比值符合WHO推荐值(5～10)∶1。所有核桃仁均含有人体所需的17种氨基酸，氨基酸占核桃仁的13％左右。10个品种核桃的氨基酸含量差异较小，其中必需氨基酸含量占总氨基酸的27.49％-28.92％，且亮氨酸的含量最高。此外，核桃仁中还富含Mn、Fe、K、P、Ca、Mg、Zn、Cu、Se、Na等微量元素。对10个不同品种核桃的37种组分作主成分分析结果显示，“铁核桃”、“新萃丰”、“扎343”和“新新2”在综合指标评定上占优势，综合营养水平较高。
　　（二）核桃青皮多酚粗提物的提取分离与纯化
　　用分光光度法测定多酚粗提物中总酚、黄酮、总糖的含量分别为13.92mg/g、131.6mg/g、565.6934mg/g。利用柱层析法对多酚粗提物进行分离纯化，得到纯度较高的核桃青皮多酚化合物。确定了AB-8型大孔树脂分离纯化青皮总多酚的工艺条件:核桃多酚粗提液浓度为3mg/ml，上样流速为2ml/min，上样量为100ml;洗脱剂乙醇体积分数30％，洗脱流速2ml/min，洗脱量为800ml。经AB-8型大孔树脂纯化后，核桃青皮总多酚的纯度由原来的1.39％提高到13.29％，精制倍数达到9.56倍。
　　（三）核桃青皮多酚粗提物对乳腺癌细胞231的凋亡作用及机理研究
　　用MTT比色法检测核桃青皮多酚粗提物对231细胞体外增殖的抑制作用;应用流式细胞术分析测定细胞周期;用拉曼光谱检测核桃青皮多酚粗提物对细胞内物质结构的变化。MTT结果表明，核桃青皮多酚粗提物对231细胞的生长有显著的抑制作用，且随药物浓度和作用时间的增加逐渐增加，呈一定的剂量和时间依赖性。流式细胞术显示随着核桃青皮粗提物浓度的增加，G0/G1期细胞逐渐增多，S期细胞逐渐减少，表明核桃青皮多酚粗提物可使细胞阻滞在G0/G1期，从而阻断细胞周期向G2/M期进行。用拉曼光谱检测谱线，发现加了核桃青皮多酚粗提物之后，细胞的拉曼强度均有所减小，且随着浓度的增大，谱线强度减小得愈发明显。推测核桃青皮多酚粗提物可能使癌变细胞内的结构大量发生断裂，细胞功能部分或完全丧失。
　　本文对10个品种核桃的脂肪、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿物质等营养成分进行比较，旨在为我国核桃的科学研究提供参考，为核桃的深加工、品种选育等提供理论依据。核桃青皮是核桃未成熟时外部的一层果皮，常常被废弃，不仅浪费资源，而且污染环境。目前，针对核桃青皮有效成分的综合利用的研究鲜有报道，其开发利用具有很大的潜力。

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