两个稻瘟菌温度敏感型突变体的数字基因表达谱分析及相关基因敲除

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致谢

摘要

第一章 文献综述

1 稻瘟病与稻瘟病菌

1．1 稻瘟菌病原生物学

1．2 稻瘟病菌的生理分化

1．3 稻瘟病的病害循环

2 转录表达谱学的研究

2．1 转录表达谱的研究方法

2．2 基因表达系列分析(SAGE)

3 数字基因表达谱测序

3．1 高通量Illumina测序简介

3．2 数字基因表达谱测流程

第二章 两个稻瘟菌温度敏感型突变体的数字基因表达分析(DEG)

1 材料与方法

1．1 试验菌株

1．2 培养基

1．3 试验试剂与仪器

1．4 常规分子生物学实验方法

1．5 突变体形态学观察方法

1．6 测序要求与内容

1．7 测序菌株材料准备与送样测序

1．8 测序结果分析方法

2 结果与分析

2．1 突变体菌落形态和生长速度测定结果

2．2 突变体致病性测定结果(大麦叶片)

2．3 突变体菌落T-146孢子萌发和附着胞形成观察结果

2．4 数字基因表达谱测序结果分析

2．5 数字基因表达差异结果

2．6 T-146数字基因表达谱标签数据库结果分析

2．7 Guy-11、T-146和T-154的表达谱对比分析

2．8 数字基因表达差异基因的功能分析

2．9 qRT-PCR验证结果与分析

3 讨论与总结

第三章 基于DEG分析结果的稻瘟菌相关基因敲除

1 实验材料

1．1 实验菌株

1．2 实验试剂与仪器

1．3 培养基配制

2 实验方法

2．1 MGG_01722，MGG_07200基因的确定与序列获得

2．2 敲除载体构建策略

2．3 转化

2．4 小量法提取稻瘟菌基因组DNA

3 结果

3．1 转化子获得

3．2 致病性测定(大麦叶片)

第四章 讨论与总结

参考文献

附录基因