侵染中国天南星科药用植物马铃薯Y病毒属成员的分子生物学研究

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论文说明：图表目录

第一章文献综述

1.1侵染天南星科植物病毒的研究进展

1.1.1侵染天南星科植物的马铃薯Y病毒属病毒

1.1.2侵染天南星科植物的其它属病毒

1.2 Potyvirus-植物寄主互作研究进展

1.2.1 Potyvirus-寄主互作研究常使用的一些技术

1.2.2 Potyvirus-寄主互作研究在抗病中的应用

1.3 Potyvirus属成员P1基因功能的研究进展

1.3.1 P1基因的功能

1.3.2 P1蛋白互作及亚细胞定位

1.3.3 P1基因的序列特征(序列同源性、重组、外源基因插入位点)

参考文献

第二章材料与方法

2.1试剂与仪器

2.1.1试剂

2.1.2仪器

2.2材料

2.2.1病样、转基因植株和无毒苗

2.2.2菌株与载体质粒

2.3方法

2.3.1普通生物学

2.3.2分子克隆

2.3.3血清学

2.3.4酵母双杂交

2.3.5拟南芥转基因

2.3.6免疫胶体金标记半夏中的SMV-P P1蛋白

参考文献

第三章侵染天南星科药用植物的马铃薯Y病毒属成员鉴定

3.1结果

3.1.1大豆花叶病毒半夏分离物

3.1.2 芋花叶病毒

3.1.3魔芋花叶病毒/马蹄莲花叶病毒

参考文献

第四章大豆花叶病毒半夏分离物P1蛋白功能

4.1 SMV-P P1免疫胶体金

4.2 SMV-P P1蛋白与病毒自身编码的10个蛋白间不存在相互作用

4.2.1构建SMV-P P1基因的诱饵杂交质粒和10个基因的猎物杂交质粒

4.2.2 DNA-BD/SMV-P P1融合蛋白和10个AD融合蛋白在酵母中表达

4.2.3单个杂交质粒不能激活报告基因表达

4.2.4 SMV-P P1蛋白与病毒自身编码的10个蛋白间不存在相互作用

4.3 SMV-P P1蛋白和半夏Rieske Fe/S蛋白相互作用

4.3.1从酵母双杂交文库中筛选到半夏Rieske Fe/S蛋白

4.3.2酵母双杂交再证明完整的P-Fe/S蛋白和P1之间互作

4.3.3免疫共沉淀证明P-Fe/S-P1体外互作

4.3.4缺失突变确定P-Fe/S-P1互作的区域

4.3.5大豆SMV-P1-Gfe/S和马蹄莲中DsMV-P1-Zfe/S互作

4.3.6 SMV-P P1和拟南芥Rieske Fe/S互作

4.4 SMV-P P1转基因拟南芥

4.4.1SMVP-P1转基因载体构建

4.4.2GFP抗血清制备

4.4.3拟南芥转基因

4.4.4共聚焦激光扫描显微镜观察到P1-GFP融合蛋白在拟南芥细胞质中表达

4.5讨论

参考文献

第五章大豆花叶病毒半夏分离物全长cDNA克隆构建

5.1 T7控制下的SMV-P全长cDNA克隆的构建

5.1.1构建策略

5.1.2构建结果

5.2 35S启动子控制下的SMV-P全长cDNA克隆构建

5.2.1构建策略

5.2.2构建结果

5.3讨论

参考文献

主要结论

论文发表情况

致 谢