鸡卵清溶菌酶的聚乙二醇修饰

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该课题为鸡卵清溶菌酶的聚乙二醇修饰,通过交联修饰的控制、修饰产物的纯化、酶活性及交联度的检测、均一性及稳定性鉴定等,一方面研究修饰溶菌的特性,为其作为酶类药物的应用提供相关实验资料,另一方面也为以后进一步研究聚乙二醇修饰其他类似酶类如溶葡萄球菌酶(lysostaphin)提供参考. 该实验修饰反应中交联剂(氰尿酰氯活化的单甲氧聚乙二醇)与溶菌酶的摩尔浓度比为35.8:1,反应12小时,产物经SephadexG-50柱层析及脱盐纯化,7﹪浓度分离胶不连续SDS-PAGE结果证实所获修饰产物是均一的聚乙二醇化溶菌酶.作者推认正是修饰结构象的改变导致酶的稳定性下降, 且此种构象的改变与以细菌细胞壁为底物的酶活性检测中修饰酶的活性损失相关.不连续DS-PAGE实验表明, 在12﹪浓度的分离胶和10﹪浓度的分离胶电泳中上述修饰HE均难以入胶.推测此现象乃修饰蛋白酶小的线性聚乙二酶所形成的空间位阻所致.故此不能采用LSDS-PAGE法测定修饰溶菌分子量.

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作者
朱小明;
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作者单位

浙江大学;

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授予单位浙江大学;
学科生物化学
授予学位硕士
导师姓名邵靖宇;
年度 2000
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类蛋白质;药物生物学;
关键词
鸡卵清溶菌酶; 酶稳定性; 聚乙二醇; 修饰;

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