高度保守的核蛋白pirin在哺乳动物红系细胞分化过程中的功能研究

声明

摘要

第一章 绪论

1．研究背景、目的和意义

1．1 研究背景

1．2 研究目的和意义

2 Pirin的研究概况

2．1 Pirin的发现及其亚细胞定位

2．2 Pirin的结构特点

2．3 Pirin的功能

2．4 与pirin生物功能相关的细胞因子

第二章 材料方法

2．1 实验材料、试剂和仪器

2．1．1 细胞、菌株以及质粒

2．1．2 主要试剂

2．1．3 主要仪器

2．1．4 主要试剂配制

2．2 实验方法

2．2．1 细胞培养

2．2．2 细胞总RNA的提取

2．2．3 免疫印迹

2．2．4 RT-PCR及半定量PCR

2．2．5 pirin的细胞定位

2．2．6 表达及干扰载体的构建

2．2．7 慢病毒的包装

2．2．8 干扰稳定株的筛选及鉴定

2．2．9 MTT法检测pirin质对MEL、k562细胞增殖活力的影响

2．2．10 pirin质低表达对MEL、K562细胞红系分化的影响

2．2．11 流式细胞仪检测pirin对MEL细胞周期的影响

2．2．12 数据分析

第三章 实验结果

3．1 Western blot验证pirin在NaBu诱导MEL细胞过程中量的变化

3．2 pirin表达水平以及定位的改变可能跟红系分化有关

3．3 半定量PCR分析pirin mRNA在NaBu诱导MEL细胞过程中量的变化

3．4 pirin低表达MEL细胞稳定株的筛选、鉴定

3．4．1 pLKO.1干扰载体的构建

3．4．2 慢病毒包装结果

3．4．3 pirin干扰稳定株的鉴定

3．5 pirin knockdown对MEL细胞活力的影响

3．6 pirin knockdown不会引起MEL细胞周期的改变

3．7 pirin knockdown对MEL细胞红系分化的影响

3．8 pirin knockdown K562细胞稳定株的筛选鉴定

3．9 pirin knockdown对K562细胞活力的影响

3．10 pirin knockdown对K562细胞红系分化的影响

3．11 pirin原核表达载体的构建和诱导表达

第四章 讨论

第五章 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

攻读学位期间的研究成果

致谢