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高效毛细管电泳法测定食品和药物中的活性成分

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1 绪论

1.1 引言

1.2 高效毛细管电泳技术简述

1.3 高效毛细管电泳技术的应用

1.4 本论文研究的主要内容及意义

2 高效毛细管区带电泳法测定3个产地沙棘果粉中的黄酮类物质的含量

2.1 引言

2.2 材料与方法

2.3 结果与分析

2.4 结论

3 高效毛细管电泳法对苹果不同部位4种酚类化合物的同时检测

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.3 结果与讨论

3.4 结论

4 高效毛细管电泳-紫外检测法同时检测决明子中5种蒽醌类成分

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.3 结果与讨论

4.4 结论

5 结论及展望

参考文献

在学期间的研究成果

致谢

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摘要

进入21世纪，随着人类生活水平的提高，人们对于健康和养生的关注度也逐渐提高，在确保食品安全的前提下，人们更多的希望通过食疗来调节自身的机能，在满足基本营养的同时也能祛除疾病。因此对于食品和药物中有效成分的分析研究成为当下的热点。在众多的分析检测技术中，毛细管电泳以其较高的分离效率，较短的分析时间，较低的成本消耗等优势广受分析检测实验的欢迎，是发现并解决各自研究领域中一些新问题的得力工具。本论文主要应用高效毛细管电泳-紫外吸收检测器对食品和药物中有效成分进行检测研究，具体内容如下：
　　第一章：主要对高效毛细管电泳及其应用作出简单的综述。在技术方面包括高效毛细管电泳的发展情况，基础分离理论，分离模式，进样技术，信号检测方式及其特点等。在了解技术的基础上，本章对高效毛细管电泳技术在不同领域的应用进行简要概括，并对本论文研究的意义做出总结。
　　第二章：应用高效毛细管区带电泳法，对3个产地沙棘果粉中的芦丁、山柰酚、异鼠李素和槲皮素4种活性物质进行同时分离测定。考察了影响电泳分离效率的各种条件：缓冲溶液20 mmol/L Na2B4O7-H3BO3，1.5 mg/mL的β-环糊精，pH9.55，检测波长370 nm，分离电压25 kV，进样时间5 s。芦丁、山柰酚、异鼠李素和槲皮素4种活性物质在11 min内实现较好分离，线性范围分别为0.01～0.51、0.05～0.93、0.02～0.65、0.03～0.81 mg/mL，相关系数r在0.9971～0.9991之间，检出限分别为5.05×10-5、2.10×10-5、3.75×10-5、1.31×10-5 mg/mL（RSN=3），各物质线性关系良好。日内及日间精密度的范围是0.08％～4.72％，平均回收率在95.51％～104.66％之间，RSD％不大于3.92％（n=3）。在优化条件下，对4种活性物质标准品的混合物进行测定，并用相同的方法对3个产地沙棘果粉中活性物质的提取液进行检测。结果表明：生产地不同的沙棘中，4种被检测化合物的含量各不相同。沙棘中被测4种化合物总量最高的产自新疆乌鲁木齐，最低的产自甘肃武威，而槲皮素含量以产自山西吕梁的最高，山柰酚和异鼠李素以产自新疆乌鲁木齐最高。通过应用该方法进行检测，可以实现沙棘果粉中多种黄酮类物质的快速分离。
　　第三章：利用高效毛细管电泳法，对苹果中根皮苷，表儿茶素，芦丁，绿原酸4种酚类化合物进行分离与测定。优化了实验条件，最佳实验条件：缓冲溶液10 mmol/L Na2B4O7-H3BO3，pH9.2，检测波长280 nm，分离电压25 kV，进样时间5 s。其线性范围分别为0.005~0.120、0.005~0.550、0.004~0.450、0.020~0.600 mg/mL，相关系数r在0.9977~0.9992之间，最低检出限分别为3.41×10-5、5.67×10-5、3.78×10-5、3.89×10-5 mg/mL（S/N=3）。之后，又进行了日内及日间精密度和平均回收率的试验，其范围分别为0.13％~4.59％和96.72％~104.55％，RSD％≤3.74％（n=3）。在优化条件下，对所检测酚类化合物标准品的混合物进行测定，并用相同的方法测定苹果皮和苹果肉样品提取液。实验结果表明，本方法操作简便、准确可靠，可作为苹果中多种酚类物质质量检测的一种手段。
　　第四章：以高效毛细管电泳-紫外检测技术为基础，研究了决明子中5种蒽醌类化合物的毛细管电泳迁移情况，通过优化实验条件，分析各种影响因素，并对所测对照品和供试品进行定性和定量分析，最终确定最佳分离条件为：检测波长284 nm，分离电压25 kV，进样时间5 s，运行缓冲溶液Na2B4O7-H3BO3浓度20 mmol/L，pH8.50，β-环糊精浓度为5 mmol/L，在该条件下，橙黄决明素，大黄素，大黄素甲醚，大黄酸，大黄酚在10 min内实现分离，线性范围依次为0.005~0.400、0.004~0.350、0.004~0.400、0.002~0.350、0.003~0.300 mg/mL，线性相关系数r大于0.9952，检出限分别为5.03×10-5、5.66×10-5、1.67×10-5、5.19×10-5、3.36×10-5 mg/mL（S/N=3），平均回收率在96.00％~103.64％（n=3）之间，RSD％在1.39％~4.56％之间。实验结果表明，该方法线性关系良好，操作简便，分析时间短，检测成本低，可以为决明子中蒽醌类成分的分析提供一定的参考。

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