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手性有机磷农药对映体的酶选择性行为研究

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摘要

有机磷农药因其具有高效地预防、消灭或控制虫害,且快速降解的特点而广泛地应用于农业。近年来许多研究表明:手性有机磷农药对映体在生物体内和环境中代谢均可能存在差异。因此,手性有机磷农药对映体的酶选择性行为研究具有重要的现实意义。
   本实验首先对育畜磷对映体在正相高效液相色谱和反相高效液相色谱两个不同系统的不同手性柱上进行了拆分,其次考察了流动相比例对育畜磷对映体拆分的影响,给出了育畜磷对映体的旋光洗脱顺序;同时研究了柱温对育畜磷对映体分离的影响。结果显示:在两个不同的高效液相色谱系统中,育畜磷对映体在色谱柱Lux Cellulose-1和LuxAmylose-2上得到了基线分离,且洗脱顺序是一致的。在正相高效液相色谱系统中,育畜磷对映体在色谱柱Lux Cellulose-2上得到完全分离,然而在反相高效液相色谱系统中,育畜磷对映体未得到基线分离。在正相高效液相色谱系统中,育畜磷左旋体先从色谱柱LuxCellulose-2洗脱下来,然而育畜磷右旋体先从色谱柱Lux Cellulose-1和Lux Amylose-2洗脱出来。虽然在正相高效液相色谱系统中,育畜磷对映体在Lux Cellulose-3上不能得到基线分离,但仍然可以明确其旋光洗脱顺序。本实验通过Van’t Hoff方程考察了柱温从5℃到40℃对育畜磷对映体分离的影响。
   本实验对育畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗的乙酰胆碱酯酶的抑制作用进行了研究。通过计算育畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗的乙酰胆碱酯酶的抑制率常数(ki),米氏参数(Km),半抑制浓度(IC50),分析得出畜磷外消旋体和育畜磷对映体单体对电鳗乙酰胆碱酯酶的抑制作用具有选择性差异,为今后的手性农药对映体机理研究奠定了研究基础。

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