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【6h】

一种新的粒毛盘菌多糖结构表征、化学修饰及生物活性研究

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本研究经发酵提取、分离纯化获得一种新的粒毛盘菌YM130胞外多糖（LEP-2a），采用单糖组成分析、甲基化分析、傅里叶变换红外光谱分析和核磁共振光谱分析对LEP-2a进行结构表征，并评价其体外抗肿瘤活性;分别对LEP-2a进行乙酰化和苯甲酰化修饰，并研究LEP-2a及其衍生物对STZ诱导的糖尿病小鼠的心血管保护作用。
　　通过高效凝胶渗透色谱(HPGPC)检测LEP-2a为均一组分，且平均分子量约为1.61×106Da。单糖组成分析结果表明，LEP-2a由甘露糖和半乳糖组成，且摩尔比为3.8∶1.0。甲基化分析、FT-IR分析和NMR分析结果表明，LEP-2a的主链由1,2-linked-α-D-Manp、1,2,6-linked-α-D-Manp、1,3,4-linked-α-D-Manp和1，3-linked-β-D-Galp组成。体外抗肿瘤活性研究表明，在浓度为100、200、300和400μg/mL时，LEP-2a能够显著增强5-氟尿嘧啶对Hela细胞的抑制作用。
　　分别对LEP-2a进行乙酰化和苯甲酰化修饰，获得取代度为0.220的乙酰化LEP-2a(ALEP-2a)和取代度为0.574的苯甲酰化LEP-2a(BLEP-2a)。FT-IR分析和13CNMR分析结果进一步证实了乙酰化和苯甲酰化修饰成功。基于13CNMR分析的结果，我们推测出→2）-α-D-Manp-(1→的C-3、C-4和C-6位，α-D-Manp-(1→的C-2、C-3、C-4和C-6位，→2，6)-α-D-Manp-(1→的C-3和C-4位，→3，4)-α-D-Manp-（1→的C-2、C-4和C-6位，→3）-β-D-Galp-（1→的C-1、C-2、C-4和C-6位以及β-D-Galp-(1→的C-2、C-4和C-6位可能被乙酰基部分取代;→3)-β-D-Galp-(1→的C-1位被完全苯甲酰化，→2)-α-D-Manp(1→、α-D-Manp-(1→和→2,6)-α-D-Manp-(1→的C-4位以及→2)-α-D-Manp-(1→、α-D-Manp-(1→、→3，4)-α-D-Manp-(1→、→3)-β-D-Galp-(1→和β-D-Galp-(1→的C-6位可能被苯甲酰基部分取代。
　　通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病小鼠模型，并研究不同剂量LEP-2a、ALEP-2a和BLEP-2a对糖尿病小鼠的心血管保护作用。结果表明，LEP-2a及其衍生物具有心血管保护作用且存在剂量-效应关系;与模型组相比，治疗组小鼠心脏、肾脏和肝脏指数显著降低，心脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)活性显著增加，丙二醛(MDA)水平显著降低，血清中晚期糖基化终产物(AGEs)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)和内皮素1(ET-1)水平显著降低，一氧化氮(NO)水平显著增加;与同剂量的LEP-2a相比，ALEP-2a和BLEP-2a表现出更显著的心血管保护作用。此外，组织病理学观察显示，治疗组小鼠受损心肌结构得到改善。综上所述，LEP-2a及其衍生物的作用机制可能与改善抗氧化防御系统、抑制氧化应激以及促进受损心肌再生有关。

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