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【6h】

The Effects of Rhubarb and Paeonia on IL-6 expression in liver failure Rat

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引言

正文

1 材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2. 结果

2.1大黄、赤芍对急性肝衰竭大鼠存活率的影响

2.2大黄、赤芍对大鼠肝功能的影响

2.3大黄、赤芍对大鼠凝血功能的影响

2.4对急性肝衰竭大鼠IL-6的影响

2.5 各时间点各组大鼠肝重指数(肝重指数=肝重/100g 体重)

2.6 各时间点各组大鼠肝细胞有丝分裂指数

2.7 各组大鼠肝组织中增殖细胞核抗原(PCNA 阳性细胞率% )表达变化

3讨论

3.1急性肝衰竭的研究进展

3.2 急性肝衰竭造模方式的研究进展

3.3 IL-6及其受体的生物学基础

3.4 IL-6与肝衰竭肝细胞再生相关问题的探讨

3.5 探讨大黄、赤芍对急性肝衰竭的研究与治疗进展

结论

参考文献

附录

综述

致谢

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摘要

目的:通过实验研究,探讨大黄、赤芍对90%肝切除后肝衰竭大鼠肝再生的影响及作用机制。  方法:采用90%肝叶切除术构建大鼠肝衰竭肝再生模型,SPF级Wistar大鼠300只,随机分为6组:假手术组50只、模型对照组50只、大黄注射液组50只、赤芍注射液组50只、大黄赤芍联合组50只、促肝细胞生长素组50只。腹腔注射给药,分别在成模后(3h、6h、12h、24h、48h、72h)6个不同的时间点,每组各取6只大鼠,经1%戊巴比妥钠麻醉,腹主动脉采血,离心收集血清,采用自动生化仪检测血清AST、ALT、TBiL含量,测定PT、PTA值;ELSA法检测血清IL-6水平;腹主静脉采血后,剖取肝脏,PBS洗净肝组织,滤纸吸干,电子天平称重,计算肝重指数;分别予10%甲醛液固定,采用HE染色法观察肝细胞有丝分裂指数;免疫组化法检测肝组织中PCNA表达;剩余大鼠用于96h存活率观察。  结果:实验各组大鼠血清ALT、AST、TBIL含量测定结果:模型组与假手术组比较,模型组ALT和AST、TBIL明显升高(P<0.01),表明肝叶切除可使残存肝细胞严重受损。中药干预组的ALT、AST、TBIL与促肝细胞生长素组比较:大黄注射液组、赤芍注射液组、大黄赤芍联合组及促肝细胞生长素组的ALT、AST和TBIL均明显降低(P<0.05),而以大黄赤芍联合组与促肝细胞生长素组下降更显著,提示大黄赤芍联合组能显著改善肝衰竭大鼠肝功能。  实验各组大鼠PT、PTA测定结果:模型组与假手术组比较,模型组PT显著升高,PTA下降,表明肝叶切除术可致残存肝组织凝血机制严重障碍。中药干预组凝血酶原时间(PT)与促肝细胞生长素组比较:24-48h大黄注射液组、赤芍注射液组、大黄赤芍联合组及促肝细胞生长素组均有下降。在改善PTA方面:大黄注射液组、赤芍注射液组、大黄赤芍联合组、促肝细胞生长素组均有上升,但以大黄赤芍联合组与促肝细胞生长素组效果明显,二者之间比较无统计学意义。说明大黄赤芍联合用药与促肝细胞生长素均能显著改善肝衰竭大鼠凝血功能。  与假手术组比较,成模后模型组、大黄注射液组、赤芍注射液组、大黄赤芍联合用药组和促肝细胞生长素组血清IL-6水平都显著增高(P<0.01);中药干预组与促肝细胞生长素组比较,以大黄赤芍联合组的升高最为明显(P<0.05),提示大黄赤芍联合用药可以明显促进血清中IL-6的水平上升。  与模型组肝重指数比较:药物干预组与假手术组高于模型组,差异有显著性意义(P<0.01)。药物干预组组内比较:术后24h的肝重指数大黄赤芍联合组、促肝细胞生长素组明显高于大黄注射液组、赤芍注射液组,差异具有统计学意义(P<0.05),大黄赤芍联合组与促肝细胞生长素组比较无统计学意义(P>0.05)。说明大黄赤芍联合用药组促进肝细胞再生的作用,明显优于单味药组,与促肝细胞生长素作用相当。  术后24h的肝细胞核分裂指数,药物干预组组有丝分裂指(核分裂相/1000个肝细胞)明显高于模型组(P<0.05),大黄赤芍联合组有丝分裂指数明显高于其它药物干预组,具有统计学意义(P<0.05)。  在成模后24h,模型组、药物干预组与假手术组比较,大鼠肝组织中增殖细胞核抗原水平显著增高,有明显差异(P<0.05);组内比较,在成模后24h大黄注射液组、赤芍注射液组、大黄赤芍联合用药组、促肝细胞生长素组大鼠肝组织中增殖细胞核抗原水平明显增高(P<0.05),其中以大黄赤芍联合用药组和促肝细胞生长素组最为明显。  成模后96h各组之间的存活率比较,以促肝细胞生长素组与大黄赤芍联合组疗效最佳,大黄注射液组、赤芍注射液组疗效其次,最差为模型组。通过本研究可以认为大黄、赤芍以及促进肝细胞生长素均能提高肝衰竭大鼠的存活率,且以大黄赤芍联合用药疗效最为显著。  结论:(1)大黄、赤芍能改善肝叶切除术后肝衰竭大鼠的肝功能、凝血功能,提高大鼠生存率。(2)大黄、赤芍具有增高肝叶切除术后肝衰竭大鼠血清IL-6水平的作用。(3)从肝重指数、肝细胞核分裂指数、增殖细胞核抗原水平的表达等实验数据,推断大黄、赤芍具有促进肝衰竭大鼠肝细胞再生的作用。(4)大黄、赤芍具有改善肝叶切除术后肝衰竭大鼠肝功能、凝血功能、肝重指数、肝细胞核分裂指数、增殖细胞核抗原水平以及提高肝切除术后肝衰竭大鼠存活率的作用,并且与肝衰竭大鼠血清IL-6水平的升高呈现高度一致性。提示药物治疗组可能是通过升高大鼠血清IL-6的水平,从而促进肝衰竭大鼠残存肝细胞的增殖,最终达到肝切除术后肝衰竭大鼠生存率的提高。

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