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mTLR9+中性粒细胞介导的抗炎通路在小鼠细菌性腹膜炎中的保护作用及机制研究

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第一章 绪论

1 细菌性腹膜炎

1.1 细菌性腹膜炎的发病机制

1.2 细菌性腹膜炎的诊断治疗

1.3 细菌性腹膜炎的研究进展

2 炎症预适应

3 中性粒细胞

3.1 中性粒细胞的基本概述

3.2 中性粒细胞的基本功能

3.3 中性粒细胞的表型

3.4 中性粒细胞与细菌性腹膜炎

4 Toll样受体家族

4.1 TLRs家族的基本概述

4.2 TLR9与MyD88依赖性途径

4.3 TLR9与mTLR9

5 小窝蛋白-1

5.1 Cav-1的基本概述

5.2 Cav-1与TLR9

6 IRFs家族

6.1 IRFs家族的基本概述

6.2 IRF4/IRF5与MyD88在巨噬细胞分型中的作用

6.3 IRF4/IRF5与TLR9在炎症反应中的调节作用

7 利用Tol2转座子构建转基因斑马鱼

7.1 斑马鱼的生物学特性及应用

7.2 Tol2转座子系统构建转基因斑马鱼

第二章 材料与方法

1 实验材料与设备

1.1 试剂与材料

1.2 模式生物

1.3 MPLA

1.4 培养基

1.5 引物设计与合成

1.6 主要实验设备

2 实验方法

2.1 制备大肠杆菌JM109菌种

2.2 制备大肠杆菌JM109工作液

2.3 制备大肠杆菌DH5α感受态细胞

2.4 实验动物模型的建立

2.5 观察小鼠生存期

2.6 小鼠组织病理学观察

2.7 免疫印迹法检测蛋白表达情况

2.8 分离小鼠PLCs膜浆蛋白

2.9 分离小鼠PLCs核浆蛋白

2.10 免疫共沉淀法检测蛋白共表达情况

2.11 酶联免疫吸附法检测炎症因子表达情况

2.12 转基因斑马鱼的构建

第三章 实验结果

1 TLR9在MPLA介导的炎症预适应下的作用

1.1 tlr9-/-小鼠InP模型的生存状况

1.2 PLCs过继转移tlr9-/-小鼠模型的生存状况

1.3 tlr9-/-小鼠肠组织的病理学变化

1.4 tlr9-/-小鼠InP模型中的蛋白表达情况

1.5 tlr9-/-小鼠InP模型中炎症因子的表达情况

2 Cav-1诱导mTLR9在InP中的预保护作用

2.1 cav-1-/-小鼠InP模型的生存状况

2.2 cav-1-/-小鼠肠组织的病理学变化

2.3 cav-1-/-小鼠InP模型中mTLR9蛋白的表达情况

2.4 cav-1-/-小鼠InP模型中炎症因子的表达情况

3 IRF4/IRF5在MPLA介导的炎症预适应(InP)中的作用

3.1 IRF4/IRF5在InP模型中的表达情况

3.2 IRF4/IRF5与MyD88共表达情况

3.3 IRF4/IRF5核浆蛋白在InP模型中的表达情况

3.4 小鼠InP模型中炎症因子的表达情况

4 MyD88过表达转基因斑马鱼的构建

4.1 目的基因的扩增

4.2 Tol2载体骨架的线性化

4.3 目的基因和载体骨架的连接、转化、涂板

4.4 重组质粒的筛选及鉴定

4.5重组质粒的活体验证

第四章 讨论

1 MPLA介导的炎症预保护作用

2 mTLR9+PMN诱导的预保护作用机制

3 应用Tol2转座子构建转基因斑马鱼

第五章 结论

参考文献

致谢

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著录项

  • 作者

    王若南;

  • 作者单位

    吉林大学;

  • 授予单位 吉林大学;
  • 学科 生物化学与分子生物学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 孙巍;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R58R51;
  • 关键词

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