鸡防御素基因的克隆、组织分布及Gal-2基因的原核表达

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文献综述

1引言

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1实验动物的组织

2.1.2菌株与载体

2.1.3主要工具酶及试剂盒

2.1.4其他相关试剂

2.1.5标准参照物

2.1.6缓冲液及培养基的配制

2.1.7仪器设备

2.2实验方法

2.2.1鸡13种防御素基因的克隆及组织表达

2.2.2鸡Gal-2基因的克隆载体及原核表达载体的构建

3结果与分析

3.1鸡不同组织总RNA的提取

3.2鸡Gal基因的克隆及其在各个组织中的分布

3.2.1凝胶电泳图

3.2.2测序比对结果

3.2.3 Gal基因组织分布

3.3鸡GAL-2基因的克隆及表达

3.3.1Gal-2基因在不同日龄(7日、30日、365日)鸡骨髓中的表达情况

3.3.2鸡重组质粒pGEM-T-Gal-2的PCR鉴定

3.3.3鸡重组质粒pGEM-T-Gal-2的双酶切鉴定

3.3.4鸡重组质粒pMAL-c2X-Gal-2菌落PCR鉴定

3.3.5鸡重组质粒pMAL-c2X-Gal-2的双酶切鉴定

3.3.6经IPTG诱导表达后的蛋白电泳图

4讨 论

4.1鸡防御素基因的克隆和组织分布

4.2关于实验方法

4.2.1反转录温度的选择

4.2.2 Gal-2基因的引物设计

4.2.3载体克隆策略

4.2.4 pMAL-c2x原核表达载体的选择

4.3实验动物的选取对Gal-2基因表达的影响

4.4本实验的后续研究

5结论

参考文献

致谢

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