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茶树油提取物对Lewis肺癌细胞及其小鼠移植瘤生长的影响

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摘要

符号说明

文献综述

1．茶树油简介

1．1 茶树油有效成分

1．2 茶树油的提取工艺

2．茶树油的作用

2．1 茶树油的消炎作用

2．3 茶树油的免疫增强作用

3．茶树油的应用

3．2 茶树油在皮肤疾病方面的应用

3．3 茶树油在食品行业的应用

3．5 茶树油在其他方面的应用

3．6 茶树油抗肿瘤的潜在可能性

第一章 茶树油提取物对小鼠Lewis肺癌细胞体外生长的影响

1．4 主要试剂和耗材

2．方法

2．3 流式细胞术检测LLCs细胞凋亡

2．4 流式细胞术检测LLCs细胞周期

2．5 统计分析

3．2 茶树油提取物对LLCs细胞凋亡的影响

3．3 茶树油提取物对LLCs细胞周期的影响

4．结论与讨论

第二章 茶树油提取物对小鼠LLCs细胞移植瘤生长的影响

1．5 主要药物与试剂

2．3 统计分析

3．2 茶树油提取物瘤内注射对小鼠LLCs移植瘤生长的影响

3．3 茶树油提取物腹腔注射对小鼠LLCs移植瘤生长的影响

4．结论与讨论

全文结论

参考文献

致谢

声明

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摘要

茶树油(Tea Tree Oil，TTO)，是目前已知抗菌作用较好的天然产物，主要由萜类物质组成，具有抗菌消炎、抗病毒等作用，还对黑色素瘤细胞、人白血病细胞和胃肠道肿瘤等多种细胞有不同程度的抑制作用。对TTO的研究及应用多有报道。　　目的：本文利用小鼠Lewis肺癌细胞(LLCs)体外培养，及小鼠LLCs移植瘤模型，通过MTT试验、细胞周期和细胞凋亡检测等，研究茶树油提取物不同处方对LLCs体外生长、及小鼠LLCs移植瘤生长的影响，筛选茶树油提取物的较好处方，为茶树油提取物作为肺癌治疗的应用积累基本资料。　　方法： LLCs细胞体外培养试验中，茶树油提取物（0.01％、0.05％和0.1％）处理细胞24h后，通过MTT比色法检测细胞活力，比较不同处方对LLCs的抑制作用。利用流式细胞术检测LLCs的细胞凋亡和细胞周期，以细胞凋亡率、细胞周期分布评价茶树油提取物对LLCs细胞的生长的影响。　　C57BL/6小鼠LLCs移植瘤体内试验中，首先以1×107· mL-1的LLCs细胞于小鼠腋下皮下注射，建立LLCs细胞移植瘤模型，测定肿瘤长和宽，计算体积。分别进行受试物瘤内注射和腹腔注射给药。①瘤内注射:待肿瘤长径至9mm时进行瘤内注射给药。试验分成空白对照组(PBS)、环磷酰胺阳性对照(1.2mg· mL-1)组和10％茶树油提取物，0.1 mL/只，连续给药5d，每日测量肿瘤的长和宽，根据肿瘤体积计算抑瘤率。②腹腔注射:于注射LLCs细胞液当天，进行腹腔注射给药。试验分成空白对照组(PBS)，环磷酰胺阳性对照(3.75mL· kg-1)、5％茶树油提取物溶液(2.5mL· kg-1);持续给药5d。每日测量肿瘤的长和宽，根据肿瘤体积计算抑瘤率。　　结果：MTT法结果表明，0.01％、0.05％和0.1％的茶树油提取物均可显著抑制LLCs细胞的活力(P＜0.05)，各处方对LLCs细胞活力的抑制作用顺序为处方二＞处方五＞处方六＞处方四＞处方一＞处方三，处方二的抑制作用较好。0.01％、0.05％、0.1％茶树油提取物组，LLCs细胞凋亡率显著增加，且随浓度的增加而显著增强(P＜0.05)。细胞周期检测结果显示，0.01％、0.05％、0.1％的茶树油提取物对LLCs细胞的细胞周期有较大影响，随着浓度的增加，细胞周期的紊乱越严重(P＜0.05)。　　在小鼠移植瘤模型中，瘤内注射和腹腔注射结果显示，茶树油提取物各处方组的肿瘤体积均显著低于正常对照组(P＜0.01)。各处方对LLCs移植瘤生长的抑制作用表现为处方四＞处方二＞处方六＞处方三＞处方五＞处方一。其中处方四对小鼠LLCs细胞移植瘤体积的抑制作用最为明显。　　结论：茶树油提取物在体外能抑制小鼠LLCs细胞生长，促进细胞凋亡，并可导致细胞周期紊乱;其在体内能抑制小鼠LLCs细胞移植瘤的生长。说明茶树油提取物在肺癌治疗上具有一定的潜在可能性。

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