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摘要
缩略词表
第一章绪论
1．1纤维素的结构
1．2纤维素的生物降解
1．2．1纤维素降解微生物
1．2．2纤维素的生物降解策略
1．3多糖利用座位的研究
1．5哈氏噬纤维菌的研究
1．5．1哈氏噬纤维素菌中多糖利用座位的研究
1．5．2哈氏噬纤维菌纤维素吸附的研究
1．6论文立题依据及研究内容
第二章chu_1279缺失突变株构建及表型分析
2．1材料与试剂
2．1．1菌株与质粒
2．1．2引物
2．1．3主要仪器
2．1．4主要试剂
2．1．5培养基与培养条件
2．2实验方法
2．2．3 C．hutchinsonii基因组提取
2．2．4 C．hutchinsonii电转化
2．2．5回补载体构建
2．2．6 C．hutchinsonii生长性质测定
2．2．7 C．hutchinsonii纤维素酶酶活测定
2．2．8菌体的纤维素吸附测定
2．3结果与分析
2．3．1 chu_1279基因序列分析
2．3．2 chu_1279缺失突变株的构建
2．3．3突变株Δ1279在不同碳源培养基中的生长测定
2．3．4突变株Δ1279纤维素酶活测定
2．3．5突变株Δ1279对纤维素吸附能力测定
2．4小结与讨论
第三章CHU_1279重组蛋白的表达纯化与功能探究
3．1材料与试剂
3．1．1菌株与质粒
3．1．2引物
3．1．3主要仪器
3．1．4主要试剂
3．1．5培养基与培养条件
3．2实验方法
3．2．1重组表达质粒与重组工程菌株的构建
3．2．2蛋白诱导表达与纯化
3．2．3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
3．2．4蛋白浓度测定
3．2．5蛋白缓冲液置换方法
3．2．6蛋白吸附多糖能力的测定
3．2．7 SEM观察CHU_1279孵育滤纸表面纤维素形态变化
3．2．8 DSC测定热稳定性变化
3．2．9蛋白结晶条件筛选与优化
3．2．10 XRD检测CHU_1279孵育纤维素结晶度变化
3．3结果与分析
3．3．1重组蛋白的异源表达与纯化
3．3．2蛋白吸附性质测定
3．3．3差示扫描量热法测定热稳定性变化
3．3．4 SEM观察CHU_1279对滤纸表面纤维素结构的破坏作用
3．3．5 CHU_1279蛋白结晶条件筛选与优化
3．3．6 CHU_1279同源蛋白功能研究
3．4讨论与小结
第四章CHU_1279参与吸附纤维素的重要氨基酸位点的鉴定
4．1材料与试剂
4．1．1菌株与质粒
4．1．2引物
4．1．3主要仪器
4．1．4主要试剂
4．1．5培养基与培养条件
4．2实验方法
4．2．2突变体蛋白对纤维素吸附定性定量实验
4．2．3圆二色谱测定蛋白二级结构变化
4．3实验结果
4．3．1 CHU_1279突变体构建及表达
4．3．2突变体蛋白与纤维素的结合作用分析
4．3．3圆二色谱测定氨基酸点突变对CHU_1279二级结构的影响
4．4讨论与小结
全文总结
参考文献
致谢
山东大学;
