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临床标本与医院环境分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及分子流行病学研究

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第一部分:临床标本与医院环境分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分布情况及耐药性分析

1 前言

2 材料和方法

3 结果

5 结论

6 参考文献

第二部分:临床标本与医院环境分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

1 前言

2 材料和方法

3 结果

4 讨论

5 结论

6 参考文献

附图:spa各型测序图及检索结果

附 录

致谢

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子生物学分型技术进展

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摘要

目的:研究临床标本与医院环境分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistance Staphylococcus aureus,MRSA)的临床分布、耐药表型及分子流行病学特征,为防控由MRSA引起的医院感染提供依据。
  方法:使用MicroScan walkaway-40SI全自动微生物分析仪对临床标本与医院环境中分离的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)进行鉴定及药敏试验,应用头孢西丁纸片法筛选出其中的MRSA并通过检测mecA基因对筛选结果进行确证,然后通过多重PCR扩增特异基因片段对MRSA进行SCCmec基因分型,并应用spa分型技术进行同源性分析。所有检测数据均应用WHONET5.6软件及SPSS18.0软件,按CLSI2012年标准进行统计分析。
  结果:2012年1月至6月期间,自临床标本中共分离SA111株,其中MRSA44株,检出率为39.6%(44/111),自医院环境共分离SA37株,其中MRSA7株,检出率为18.9%(7/37)。临床标本分离的MRSA主要分布于NICU、呼吸内科、ICU和神经外科,其构成比分别为15.9%(7/44)、11.4%(5/44)、9.1%(4/44)、9.1%(4/44),且主要分离自痰、分泌物/脓液和血标本。医院环境分离的MRSA分布于NICU(4株)、呼吸内科(1株)、ICU(1株)和神经外科(1株),主要分离自医务人员手、呼吸机及其它医疗设备。临床与医院环境分离MRSA对各类抗菌药物的耐药率无显著性差异(P>0.05),均表现为对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、利奈唑胺、喹努普丁/达福普汀和万古霉素敏感,而对其它抗菌药物呈现多重耐药。所有MRSA均检测出mecA基因,检出率为100.0%(51/51)。SCCmec分型结果显示,环境分离株分为两型:SCCmecⅢ型菌株检出6株,占85.7%(6/7);SCCmecⅣ型检出1株,占14.3%(1/7)。临床分离株分为四型:其中SCCmecⅡ型检出8株,占18.2%(8/44);Ⅲ型检出22株,占50.0%(22/44);Ⅳ型检出12株,占27.3%(12/44);Ⅴ型检出1株,占2.3%(1/44),未检出Ⅰ型菌株,并有1株MRSA未能分型。上述MRSA临床分布特点为:SCCmecⅢ型MRSA主要分布在NICU、呼吸内科、ICU和神经外科,且主要自痰标本中检出;而SCCmecⅣ型MRSA主要分布在急诊外科、普外科和耳鼻喉头颈外科,主要自分泌物/脓液标本中检出。分析各型耐药率可见:SCCmecⅢ型MRSA耐药率高于Ⅱ型及Ⅳ型,呈现多重耐药。对NICU、呼吸内科、ICU、神经外科分离出的MRSA进行spa基因分型可见:NICU病区内主要流行株为t437型,呼吸内科病区主要流行株为t030型,而ICU和神经外科流行株相同,均为t034型,且上述科室临床分离株与环境分离株高度同源。
  结论:(1)临床标本与医院环境分离的MRSA均以SCCmecⅢ型为主,且呈现多重耐药。(2)SCCmecⅢ型MRSA主要从痰标本中检出,提示住院患者下呼吸道MRSA感染多为医院获得性感染。(3)spa分型结果显示临床标本与医院环境分离的MRSA有较高的同源性,且不同科室间存在同型菌株的交叉传播。(4)MRSA定植于医务人员手、呼吸机及其它医疗设备是导致其医院感染流行传播的重要因素。

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