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烹调油烟中的细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞毒性和遗传毒性的研究

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研究一油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞毒性及氧化损伤的研究

中文摘要

英文摘要

1 前 言

2 材料和方法

2.1 采样材料

2.2 仪器及设备

2.3 试剂

2.4 样品的采集方法

2.5 细胞培养及其鉴定

2.6 肺泡Ⅱ型上皮细胞存活率(MTT)的测定

2.7 丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量的测定

2.8超氧化物歧化酶活力的测定

2.9谷胱甘肽氧化酶含量的测定

2.10 统计学分析方法

3.结果

3.1 肺泡Ⅱ型上皮细胞的鉴定

3.2 PM2.5对AECⅡ存活率的影响

3.3 PM2.5对AECⅡ培养上清液中细胞分泌的SOD、MDA及GSH的影响

4 讨论

5结论

参考文献

研究二油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞遗传毒性研究

中文摘要

英文摘要

1 前 言

2.材料和方法

2.1 仪器及设备

2. 2 试剂

2.3 彗星实验步骤

2.4 肺泡Ⅱ型上皮细胞PAH-DNA加合物的测定

3 结果

3.1 PM2.5染毒AECⅡ彗星实验图片

3.2 PM2.5染毒对AECⅡ彗星olive 尾矩的影响

3.3 PM2.5染毒对AECⅡ彗星尾矩的影响

3.4 PM2.5染毒对AECⅡ彗星尾长的影响

3.5 PM2.5染毒对AECⅡ彗星尾部DNA含量的影响

3.6 PM2.5染毒对AECⅡDNA加合物含量的影响

4 讨论

5结论

参考文献

附录

致谢

综述

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摘要

研究一油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞毒性及氧化损伤的研究
  目的:探讨油烟中的细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的细胞毒性和氧化损伤。
  方法:用PM2.5采样器采集油烟中的细颗粒物,并用丙酮有机提取玻璃纤维膜中的颗粒物,最后用DMSO配制成浓度为200mg/ml染毒液。从孕18天的ICR母鼠体内取胎鼠,并从胎鼠的肺组织中提取肺泡Ⅱ型上皮细胞,进行鉴定。分别用不同浓度油烟中细颗粒物对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞进行染毒12h、24h和48h,用MTT法测细胞的存活率,用MDA、SOD、GSH的试剂盒检测颗粒物对细胞的氧化损伤。
  结果:不同浓度的细颗粒物分别作用于AECⅡ12h、24h和48h,产生了明显的细胞毒性,并呈现一定的剂量-反应关系和时间-反应关系。用PM2.5对细胞染毒以后发生脂质过氧化,并呈现一定的剂量-反应关系和时间-反应关系。与DMSO对照组相比,在24h和48h,50μg/ml组细胞内MDA含量差异有统计学意义(P<0.01),在12.5μg/ml和25μg/ml组,48h组分别与12h和24h组相比MDA含量差异有统计学意义(P<0.05),在50μg/ml组,24h和48组分别与12h相比MDA含量差异有统计学意义(P<0.05)。与DMSO对照组相比,在24h和48h,50μg/ml组细胞内SOD含量差异有统计学意义(P<0.05),在50μg/ml组,48h组与12h组相比差异有统计学意义(P<0.05)。与DMSO对照组相比,在48h,50μg/ml组细胞内GSH含量差异有统计学意义(P<0.05),在其余各个浓度组和各个时间点之间相比GSH含量差异无统计学意义。
  结论:细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)产生了细胞毒性和氧化损伤,并呈现一定的剂量-反应关系和时间-反应关系。
  研究二油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞遗传毒性研究
  目的:探讨油烟中的细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)遗传毒性。
  方法:用12.5,25和50ug/ml细颗粒物分别对细胞染毒6h,12h和24h,用彗星实验分别检测细胞的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩,用ELISA试剂盒检测细胞内PAH-DNA加合物的含量。
  结果:与对照组相比,染毒组的尾长、尾强度、尾矩和Olive尾矩有明显的增加。与低浓度染毒组相比,高浓度染毒组的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩有明显的增加(P<0.001)。与6h和12h染毒组相比,24h染毒组的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩有明显的增(P<0.001)。与6h染毒组相比,12h染毒组的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩有明显的增(P<0.001)。与低浓度染毒组相比,高浓度染毒组的PAH-DNA加合物明显的增加(P<0.05)。
  结论:细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的明显的遗传毒性,并呈现一定的剂量-反应关系和时间-反应关系。

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