基于群体感应研究香芹酚对鱼源荧光假单胞菌单/混生物被膜的抑制作用

缩略词表

1.1 水产品中的致腐菌和致病菌

1.1.1 荧光假单胞菌

1.1.2 气单胞菌

1.1.3 金黄色葡萄球菌

1.2.1 生物被膜的定义

1.2.2 混合生物被膜

1.2.3 水产品加工中生物被膜

1.3 群体感应

1.3.1 群体感应与生物被膜

1.3.2 革兰氏阴性菌的群体感应

1.3.3 革兰氏阳性菌的群体感应

1.4.1 精油

1.4.2 精油与生物被膜

1.5 本研究的目的、意义和内容

第二章 十种香芹酚和肉桂醛结构类似物的抑菌和抗生物被膜分析

2.1 前言

2.2 材料与设备

2.2.1 菌株及培养条件

2.2.2 试剂

2.2.3 主要仪器设备

2.3 试验方法

2.3.1 EOs成分MIC测定

2.3.2 结晶紫染法测定生物被膜

2.3.3 胞外多糖的测定

2.3.4 泳动和蜂拥的检测

2.3.5 显微镜观察细菌粘附

2.3.6 生物报告菌检测AHLs

2.4 数据处理和分析

2.5 结果分析

2.5.1 EOs成分的MIC

2.5.2 EOs成分抑制生物被膜

2.5.3 EOs成分抑制胞外多糖

2.5.4 EOs成分抑制粘附

2.5.5 EOs成分抑制运动能力

2.5.6 EOs成分抑制AHLs分泌

2.6 讨论

3.1 前言

3.2 材料与设备

3.2.1 菌株及培养条件

3.2.2 试剂

3.2.3 主要仪器设备

3.3 实验方法

3.3.1 香芹酚MIC测定

3.3.2 结晶紫染色测定生物被膜

3.3.3 胞外多糖的测定

3.3.4 泳动和蜂拥的检测

3.3.5 CLSM观察生物被膜结构

3.3.6 胞外蛋白酶活性测定

3.3.7 转录组学测序

3.3.8 荧光定量PCR验证

3.4 数据处理和分析

3.5 结果分析

3.5.1 香芹酚对荧光假单胞菌的MIC

3.5.2 香芹酚抑制野生株和缺失株生物被膜

3.5.3 香芹酚抑制野生株和缺失株胞外多糖

3.5.4 CLSM观察香芹酚抑制野生株和缺失株生物被膜

3.5.5 香芹酚抑制野生株和缺失株运动能力

3.5.6 香芹酚抑制野生株和缺失株胞外蛋白酶

3.5.7 香芹酚抑制野生株和缺失株AHLs信号

3.5.8 分子对接模拟香芹酚与群体感应蛋白的结合

3.5.9 转录组分析香芹酚对荧光假单胞菌被膜状态基因表达的影响

3.5.10 香芹酚对荧光假单胞菌的调控机制模拟图

3.6 讨论

第四章 香芹酚抑制荧光假单胞菌和金黄色葡萄球菌混合生物被膜形成

4.1 前言

4.2 材料与设备

4.2.1 材料、菌株及培养条件

4.2.2 试剂

4.2.3 主要仪器设备

4.3 实验方法

4.3.1 灭菌鱼汁制备

4.3.2 被膜菌的计数

4.3.3 浮游菌的测定

4.3.4 结晶紫法测定生物被膜

4.3.5 胞外多糖的检测

4.3.6 CLSM观察生物被膜

4.3.7 SEM观察粘附和被膜

4.3.8 腐败能力测定

4.3.9 溶血性测定

4.3.10 DPD和C4-HSL的外源添加

4.3.11 AI-2 信号分子测定

4.4 数据处理和分析

4.5 结果分析

4.5.1 混合培养中的浮游菌和生物被膜菌

4.5.2 多组显微镜观察混合被膜结构

4.5.3 香芹酚对共培养浮游菌抑制

4.5.4 香芹酚对混合生物被膜菌的抑制

4.5.5 香芹酚降低混合生物被膜和多糖分泌

4.5.6 CLSM观察香芹酚对混合生物被膜结构的影响

4.5.7 SEM观察香芹酚对混合生物被膜结构的影响

4.5.8 香芹酚减少荧光假单胞菌蛋白酶活性和TVB-N

4.5.9 香芹酚抑制金黄色葡萄球菌的溶血性

4.5.10 香芹酚对群体感应信号的影响

4.5.11 外源DPD和C4-HSL添加对混合生物被膜的影响

4.6 讨论

第五章 总结、创新点和展望

5.1 总结

5.2 创新点

5.3展望

参考文献

致谢

附录

声明