HMGA1在小鼠2-细胞胚胎姐妹卵裂球的差异分布影响小鼠胚胎细胞谱系的选择

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目 录

第一章 哺乳动物早期胚胎发育

1.1.1 植入前胚胎的卵裂

1.1.2 植入前胚胎的发育过程

1.1.3 母源-合子转换

1.1.4 致密化与极化

1.2.1 早期胚胎分化

1.2.2 早期胚胎细胞命运决定的几种假说

1.2.3 分子异质性与早期胚胎细胞命运决定的研究进展

第二章 HMGA1研究进展

2.1 HMGA1 结构

2.2 HMGA1 研究进展

2.3 研究目的和意义

第三章 HMGA1表达与定位

3.1.1 主要材料

3.1.2 主要试剂

3.2.1 小鼠组织RNA提取

3.2.2 小鼠卵母细胞与受精卵的采集

3.2.3 mRNA反转录

3.2.4 实时荧光定量PCR

3.2.5 蛋白免疫印迹检测

3.2.6 胚胎免疫荧光染色

3.2.7 统计分析

3.3 结果

3.3.1 HMGA1在小鼠不同组织中的表达

3.3.2 HMGA1在小鼠植入前早期胚胎中的表达与定位

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 HMGA1在小鼠 2-细胞胚胎卵裂球中的分布

4.1.1 主要材料

4.1.2 主要试剂

4.2.1 小鼠卵母细胞和受精卵的采集

4.2.2 小鼠2-细胞胚胎单卵裂球cDNA的获取与实时荧光定量PCR

4.2.3 小鼠胚胎原位杂交

4.2.4 胚胎免疫荧光染色

4.3.1 定量PCR检测HMGA1在小鼠2-细胞胚胎卵裂球中的分布

4.3.2 原位杂交检测HMGA1 在小鼠2-细胞胚胎卵裂球中的分布

4.3.3 免疫荧光检测HMGA1 在小鼠2-细胞和4-细胞胚胎卵裂球中的分布

4.4 讨论

4.5 小结

第五章 HMGA1在小鼠胚胎谱系分化中的功能研究

5.1.1 主要材料

5.1.2 主要试剂

5.2.1 小鼠卵母细胞和受精卵的采集

5.2.2 小鼠胚胎免疫荧光

5.2.3 小鼠胚胎显微注射

5.2.4 细胞培养与细胞转染

5.2.5 细胞RNA提取

5.2.6 反转录与实时荧光定量PCR

5.2.7 体外转录

5.2.8 蛋白质免疫印迹

5.3 结果

5.3.1 高效干扰Hmga1表达的siRNA筛选

5.3.2 敲降HMGA1后影响小鼠胚胎谱系分化

5.3.3 细胞水平敲降HMGA1 后影响Sox2、Oct4 的表达

5.3.4 胚胎敲降HMGA1 后影响Sox2的表达

5.4 讨论

5.5 小结

全文结论

参考文献

致 谢

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