声明
致谢
摘要
第一章综述
1植物响应高温胁迫的热应激网络
1．1蛋白质的稳态
1．2ROS的稳态
1．3激素调控通路
2环腺苷酸(cAMP)在植物中的研究进展
2．1环腺苷酸在植物生理中的作用
2．2环腺苷酸在植物免疫中的作用
2．3环腺苷酸参与植物非生物胁迫反应
3腺苷酸环化酶(ACs)在植物中的鉴定
4蛋白质组学在植物响应高温机制中的研究
4．1蛋白质组学与蛋白组技术
4．2蛋白组学在植物响应高温机制中的研究
5研究意义、目的和技术路线
5．1研究意义和目的
5．2技术路线
第二章新型腺苷酸环化酶ZmRPP13-LK3的鉴定及其在高温胁迫下的表达调控分析
1引言
2材料与方法
2．1试验材料和胁迫处理
2．2热胁迫下表型鉴定分析
2．3生理指标的测定
2．4载体的构建和提取
2．5 iTRAQ蛋白质组的方法
2．6 RT-qRCR分析
2．7通过HPLC和LC／MS检测体内和体外的cAMP的含量
2．8瞬时转化玉米原生质体
2．9大肠杆菌突变菌株哕叫回补试验
2．10ZmPSiP、zmRPP13-LK3和ZmABC2的亚细胞定位
2．11IP-MS鉴定与ZmRPP13-LK3互作的蛋白
2．12酵母文库筛选
2．13BiFc分析
2．14通过LC／MS测定玉米叶片中激素的含量
3结果与分析
3．1高温胁迫下cAMP对玉米幼苗存活率的影响
3．2高温胁迫下cAMP对玉米幼苗叶片生理指标的影响
3．3高温胁迫下cAMP调控的差异表达蛋白鉴定及分析
3．4ZmRPP13-LK3腺苷酸环化酶活性的鉴定
3．5ZmRPP13-LK3和ZmPSiP的亚细胞定位分析
3．6ZmRPP13-LK3互作蛋白的鉴定
3．7高温胁迫下ABA可以提高cAMP的含量和ZmRPP13-LK3的表达量
3．8在高温胁迫下ABA以及ZmRPP13-LK3对热休克蛋白表达的影响
3．9茎腐镰刀菌对ZmRPP13-LK3和ZmPSiP表达量的影响
4讨论
第三章cAMP增强玉米根系耐热性的蛋白组学分析
1引言
2材料和方法
2．1试验材料与胁迫处理
2．2cAMP含量的测定
2．4zmRPP13-LK3／ZmPSiP启动子∷GUS融合载体的构建
2．5GUS活性分析
2．6GUS定量分析
2．7生理指标的测定
2．9RT-qRCR分析
2．10根系离子吸收的测定
3结果与分析
3．1ABA介导在高温、干旱、复合胁迫下玉米根系cAMP的增加
3．2ABA和高温胁迫调控玉米根中两个已知AC基因的表达
3．3cAMP稳定由干旱、高温及复合胁迫引起的氧化还原稳态的变化
3．4高温胁迫下cAMP调控的玉米根系蛋白的鉴定
3．5高温胁迫下cAMP调节的玉米根中DEPs的聚类分析
3．6高温胁迫下cAMP调控的DEPs之间互作分析
3．7cAMP介导的离子运输和囊泡转运
3．9在内质网和泛素-蛋白酶体系统中的蛋白质的加工
3．10qRT-PCR验证在高温胁迫下受cAMP介导的蛋白
3．11高温胁迫下cAMP调控玉米根系对离子的吸收
4讨论
4．3cAWP缓解由高温胁迫带来的氧化损害
4．4热休克蛋白与内质网中的蛋白质加工
第四章ZmRPP13-LK3提高玉米耐热性的遗传转化验证
1引言
2材料与方法
2．1试验材料与处理
2．2试验所需的菌株和酶类
2．3载体的构建
2．4农杆菌的转化
2．5农杆菌侵染玉米幼胚
3结果与分析
3．1ZmRPP13-LK3-gRNA的筛选
3．2转基因阳性植株的鉴定
3．3ZmRPP13-LK3的过表达和失活株系影响玉米苗期的耐热性
3．4ZmRPP13-LK3转基因株系田间表型观察
4讨论
第五章结论
1主要结论
2创新之处
3下一步研究计划
参考文献
附录
作者简介
河南农业大学;
