缺血后处理对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马区SOCS-3及TNF-a表达的影响

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目的：建立糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注（I/R）模型，观察缺血后处理（IP）对大鼠海马区细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS-3）及肿瘤坏死因子a（TNF-a）表达的影响，进一步探讨IP对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤是否有脑保护作用及可能发生的机制。　　方法：1.建立糖尿病大鼠模型及分组：选用115只成年健康雄性SD大鼠，随机分为两组：糖尿病组（105只）予以高脂高糖饲料饲养，并使用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射诱发糖尿病，普通组（10只）予以普通饲料饲养。将制备的糖尿病模型大鼠随机分为假手术组（sham组，35只）、缺血再灌注组（I/R组，35只）及缺血后处理组（IP组，35只），每组以脑缺血90min再灌注后时间点（3h，6h，12h，24h，48h，72h）不同分为6个亚组，每个亚组5只，24h亚组增加5只行TTC染色。局灶性脑缺血再灌注的模型于缺血90min后拔出线栓给予再灌注的方法制作，缺血后处理的模型于再灌注之前通过灌注15s/闭塞15s，重复3次的方法制作。2.检测指标：测定大鼠尾静脉血糖浓度，对各时间点大鼠进行神经功能缺损评分，TTC染色测定各组大鼠术后24h脑梗死体积，HE染色观察大鼠海马CA1区形态学改变,免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区SOCS-3及TNF-a的表达，TUNEL荧光检测各组大鼠术后24h海马CA1区凋亡细胞的表达。　　结果：1.糖尿病大鼠造模评估：高脂高糖饲料饲养组大鼠尾静脉血糖浓度较普通饲料饲养组高，差异具有统计学意义（P＜0.05）,说明糖尿病大鼠造模成功。2.神经功能缺损评分：sham组无明显神经功能缺损症状，I/R组和IP组于再灌注后出现不同程度的神经功能缺损，且均在24h时间点评分最低，在各时间点神经功能评分均低于sham组（P均＜0.05）；与I/R组比较，IP组各时间点评分显著增高（P均＜0.05）。3.TTC染色测定脑梗死体积：术后24h取脑组织行TTC染色，sham组脑组织为均匀红色，无梗死灶，IP组及I/R组脑组织均可见苍白色梗死灶，且IP组梗死体积较I/R组显著减小（P＜0.05）。4.海马CA1区病理改变：sham组海马CA1区未见病理损伤变化，IP组海马CA1区病理损伤较I/R组减轻。5.海马CA1区SOCS-3的表达：sham组中仅见SOCS-3微量表达，其在I/R组的表达于再灌注3h开始升高，24h达高峰后逐渐下调，在72h仍有表达，IP组中SOCS-3表达趋势与I/R组相同；但与I/R组各时间点比较，IP组中SOCS-3的表达明显升高（P均＜0.05），且I/R组及IP组各时间点的SOCS-3表达均显著高于sham组（P均＜0.05）。6.海马CA1区TNF-a的表达：sham组中有少量TNF-a表达，I/R组及IP组中各时间点TNF-a的表达均显著高于sham组（P均＜0.05）；其在I/R组的表达于再灌注3h开始升高，24h达高峰，72h表达下调，IP组中TNF-a表达趋势与I/R组相同，但与I/R组各时间点比较，IP组中TNF-a的表达明显降低（P均＜0.05）。7.术后24h海马CA1区凋亡细胞的表达：sham组可见极少凋亡细胞，I/R组及IP组中可见多量凋亡细胞，两组凋亡细胞数较sham组均显著升高（P均＜0.05），与I/R组比较，IP组凋亡细胞数明显减少（P＜0.05）。　　结论：1.自由进食高脂高糖饲料建立糖尿病大鼠模型并通过此模型建立大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型，更加贴近人类疾病的病理生理过程。2.糖尿病大鼠脑缺血再灌注后，出现神经功能缺损及海马区缺血性病理改变，海马区SOCS-3、炎性因子TNF-a及凋亡细胞表达增多。3.缺血后处理能改善糖尿病大鼠神经功能障碍，减轻海马区缺血性病理改变，使海马区SOCS-3表达增加，TNF-a及凋亡细胞表达减少，说明缺血后处理可能是通过增加SOCS-3表达以抑制TNF-a表达、减轻细胞凋亡程度，从而发挥神经保护作用。

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作者
李金容;
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作者单位

西南医科大学;

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授予单位西南医科大学;
学科神经病学
授予学位硕士
导师姓名唐兴江;
年度 2019
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类
关键词
糖尿病,脑缺血再灌注,缺血后处理,海马区,细胞因子信号转导抑制因子3,肿瘤坏死因子a;

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