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壮医药线点灸对糖尿病性胃轻瘫大鼠脑肠肽Ghrelin、CCK及SCF/c-kit信号通路的影响

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摘要

目的:  观察壮医药线点灸疗法对糖尿病性胃轻瘫 (DGP) 模型大鼠血糖、尿糖值、胃排空率、小肠推进率、胃促生长素(Ghrelin)、胆囊收缩素(CCK)、干细胞因子(SCF)和酪氨酸激酶受体(c-kit)阳性细胞(ICCs)表达的影响,以脑肠肽Ghrelin、CCK和SCF/c-kit信号通路为研究的切入点,探讨壮医药线点灸疗法调控血糖,加速胃排空,改善DGP的疗效机制。  方法:  将80只SD大鼠随机分为4组:空白组,模型组,壮医药线点灸组(点灸组),胃复安组,每组 20 只。采用 2% 链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射并配合高糖高脂饲料不规则饲养法制备DGP大鼠模型。点灸组予药线点灸“中脘”“脾俞”“胃俞”“内关”“足三里”穴位,每穴1壮,胃复安组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每日1次,连续15d。实验结束后,用OneTouch 血糖仪监测血糖,尿糖试纸测尿糖,酚红灌胃法测量大鼠胃排空率和小肠推进率,酶联免疫法(ELISA)法检测大鼠血清Ghrelin、SCF水平、胃窦CCK含量,免疫组化法检测胃窦c-k it阳性细胞(ICCs)表达。  结果:  ①饮食量、体质量:与空白组比较,模型组大鼠体质量、饮食量明显下降(P<0.01);与模型组比较,点灸组大鼠体质量、饮食量明显增加(P<0.01)。②血糖、尿糖值:与空白组比较,模型组大鼠血糖、尿糖值明显升高(P<0.01),提示糖尿病(DM)模型建立成功;与模型组比较,点灸组血糖、尿糖值明显降低(P<0.01)。③胃肠推进率:与空白组比较,模型组大鼠胃排空率、小肠推进率均明显下降(P<0.01),表明DM模型大鼠胃肠推进率降低,结合症状和血糖值,说明DGP大鼠模型制备成功;与模型组比较,点灸组大鼠胃排空率、小肠推进率均明显升高(P<0.01)。④脑肠肽Ghrelin、CCK含量:与空白组比较,模型组大鼠Ghrelin水平下降、CCK含量升高(P<0.01);与模型组比较,点灸组大鼠Ghrelin水平升高、CCK含量降低(P<0.01)。⑤SCF含量、c-kit阳性细胞(ICCs)表达:与空白组比较,模型组大鼠 SCF 含量、c-kit 阳性细胞(ICCs)表达均降低(P<0.05);与模型组比较,点灸组大鼠SCF含量、c-kit阳性细胞(ICCs)表达均增加(P<0.05);光学显微镜下观察,空白组大鼠c-kit阳性蛋白表达较多,分布集中,模型组大鼠c-kit阳性蛋白明显减少,散布于肌层间。  结论:  壮医药线点灸能调节胃肠运动和功能,增加DGP大鼠饮食量、体质量;壮医药线点灸能直接刺激胰岛 β 细胞,促进胰岛素分泌,降低血糖浓度,从而调控DGP大鼠血糖水平;壮医药线点灸改善DGP症状,增强胃肠动力的作用机制是通过①上调血清Ghrelin表达水平并下调胃窦CCK水平,纠正外周和脑内脑肠肽分泌紊乱状态。②上调SCF/c-kit信号通路,逆转ICCs损伤,恢复胃肠平滑肌(SMC)的胃电节律。壮医药线点灸上调 SCF/c-kit 信号通路来修复 ICCs 的过程,与其调节脑肠肽分泌密切相关。

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