声明
摘要
主要符号对照表
1引言
1．1青春期酒精暴露研究进展
1．1．1青春期酒精暴露的临床研究
1．1．2青春期酒精暴露的临床前研究
1．2DUSP6与青春期酒精暴露
1．2．1DUSPs简介
1．2．2DUSP6的底物特异性和催化机制
1．2．3DUSP6、ERK-CREB-BDNF与青春期大脑发育
1．2．4DUSP6、ERK-CREB-BDNF与青春期酒精暴露
1．3拟解决关键问题
2青春期慢性酒精暴露对成年期情感、认知和mPFC内DUSP6、ERK-CREB-BDNF的影响
2．1材料与仪器
2．1．1实验动物
2．1．2主要试剂
2．1．3主要仪器设备
2．2实验方法与步骤
2．2．1实验流程
2．2．2AIA组小鼠血酒精浓度检测
2．2．3高架十字迷宫实验
2．2．4新物体识别实验
2．2．5三箱社交实验
2．2．6免疫荧光染色检测MAP2及DUSP6
2．2．7Western blot
2．2．8统计学分析
2．3实验结果
2．3．1青春期酒精暴露期间小鼠的生理状态
2．3．2青春期间歇性酒精暴露不影响成年后小鼠的焦虑样行为
2．3．3青春期间歇性酒精暴露损害成年小鼠短期识别记忆
2．3．4青春期间歇性酒精暴露损害成年小鼠社交识别记忆
2．3．5青春期间歇性酒精暴露损害神经元突触
2．3．6青春期间歇性酒精暴露诱导mPFC内DUSP6表达长期升高
2．3．7青春期间歇性酒精暴露诱导成年期mPFC内ERK-CREB-BDNF活性降低，进而降低NR2A、PSD95的表达
2．4小结
3 mPFC内微量注射AAV-DUSP6-shRNA对青春期酒精暴露所致成年期认知及突触结构异常的保护作用
3．1材料与仪器
3．1．1实验动物
3．1．2主要试剂
3．1．3主要仪器设备
3．2实验方法与步骤
3．2．1实验流程
3．2．2病毒载体的显微注射
3．2．3新物体识别实验
3．2．4三箱社交实验
3．2．5病毒载体位置验证
3．2．6免疫荧光染色检测MAP2
3．2．7透射电子显微镜(Transmission electron microscopy，TEM)
3．2．8Western blot
3．2．9统计学分析
3．3结果
3．3．1AAV的表达位置确认和敲减效率
3．3．2mPFC内敲减DUSP6减轻了青春期酒精暴露所致成年期识别记忆损害
3．3．3mPFC内敲减DUSP6减轻了青春期酒精暴露所致成年期社交识别记忆损害
3．3．4mPFC内敲减DUSP6降低了青春期酒精暴露所致成年期神经元树突损伤
3．3．5mPFC内敲减DUSP6改善了青春期酒精暴露所致成年期突触后致密区厚度变薄
3．3．6 mPFC内敲减DUSP6逆转了青春期酒精暴露所致成年期ERK-CREB-BDNF活性降低，及PSD95、NR2A的表达降低
3．3．7青春期酒精暴露诱发长期认知损害的分子机制
3．4小结
4讨论
4．1行为学方法评价
4．1．1青春期慢性间歇性酒精暴露模型的建立
4．1．2AAV载体操控基因表达的优势
4．2青春期酒精暴露所致长期行为学异常
4．2．1PFC在青春期慢性酒精暴露诱导的长期认知损害中的作用
4．2．2突触可塑性在青春期慢性酒精暴露诱导的长期认知损害中的作用
4．2．3DUSP6和ERK-CREB-BDNF在青春期酒精暴露诱导的长期认知损害中的作用
4．3本研究局限之处
5结论与展望
5．1结论
5．2展望
参考文献
综述
个人简历
致谢
郑州大学;
