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纳米SiO2与微米SiO2对肝肺组织中DNA氧化损伤的比较研究

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实验材料与方法

实验结果（一）

实验结果（二）

讨 论

结 论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 DNA氧化损伤标记物8-OHdG检测意义及检测技术的研究进展

致 谢

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摘要

目的：纳米材料是由粒径分布在0.1-100nm范围的纳米粒子组成的，并且出现纳米效应的材料。由于结构上的特殊性使纳米材料出现表面效应、量子尺寸效应、宏观量子隧道效应等新的效应。研究证明，纳米材料可以在动物的呼吸道各段和肺泡内沉积，引发肺组织的氧化性损伤和炎症反应，进而可以通过血肺屏障，肺外转移到肝脏等组织。 纳米粒子的肺肝毒性研究目前尚处于初步阶段，研究结论也不一致，特别是对DNA氧化损伤的研究试验数据很少。本试验选取二氧化硅纳米及其微米粉体作为实验材料，以8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化物损伤标志物，比较吸入纳米二氧化硅及其微米粉体对小鼠肝肺组织中DNA氧化损伤的影响，并探讨其作用机制。 实验材料与方法 一、动物分组及染尘健康雄性昆明种小鼠50只，体重18-22g，适应性喂养1w，按体重随机分为5组：空白对照组，纳米SiO<,2>微米SiO<,2>分别设50、200mg/m<'3>剂量组，每组lO只动物。有机玻璃染尘柜体积为100L，静式呼吸道吸入染毒2h，隔日染毒一次，连续染毒28天实验为期28天，除染尘时间外动物自由进食和饮水。染毒结束时处死大鼠。 二、观察指标及检测方法 1、各染尘组肺脏组织病理学变化-HE染色 2、各染尘组肝脏组织病理学变化-HE染色2、肝、肺组织DNA氧化损伤检测-8-OHdG Elisa试剂盒 三、数据处理用SPSS13.0统计软件对各项指标的实验数据进行处理，所有结果用均值x±s表示，正态分布的数据采用方差分析进行统计处理；非正态分布的数据采用秩和检验进行统计分析，p<0.05作为显著性水平。 实验结果 1、各染尘组小鼠肺脏组织的HE染色 对照组肺脏肺泡壁细胞分布均匀，肺泡腔内无炎性细胞浸润，细胞结构完整，支气管上皮细胞结构完整，无炎性细胞浸润，管腔内无炎性细胞及液体分泌。纳米200mg/m<'3>剂量组肺泡间隔稍增厚，炎性细胞轻微增多外，其它各剂量组病理结构正常，无炎症改变。 2、各染尘组小鼠肝脏组织的HE染色 对照组小鼠肝小叶界板无破坏，小叶结构清楚，汇管区和门静脉正常，肝细胞核完整。微米SiO<,2> 50mg/m<'3>组及更高剂量组出现肝细胞核溶解现象。纳米SiO<,2>50mg/m<'3>剂量组肝细胞出现广泛变性，且以细胞水肿为主，表现为细胞质疏松淡染和气球样变。肝细胞体积增大，排列紊乱拥挤肝窦受压而变窄，胞质内呈碎絮状，出现轻度核坏死和溶解现象。纳米SiO<,2> 200mg/m<'3>剂量组肝细胞出现核碎裂和核固缩、溶解现象，肝小叶内出现大量嗜酸性小体。 3、各染尘组肝、肺组织DNA氧化损伤程度 (1)肺组织中8-OHdG的阳性率 微米SiO<,2>、纳米SiO<,2>各组小鼠支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞8-OHdG细胞阳性率显著高于对照组水平(p<0.01)。纳米SiO<,2>组气管上皮细胞和肺泡上皮细胞8-OHdG阳性率显著高于相同剂量微米Si02组水平(P<0.05)。纳米与微米SiO<,2>200mg/m<'3>剂量组水平显著高于同粒径粒子50mg/m<'3>剂量组水平(p(0.05)。 (2)肝脏组织中8-OHdG的含量 纳米SiO<,2>各组小鼠肝脏细胞内8-OHdG细胞阳性率显著高于对照组水平(p<0.01)，微米SiO<,2>各组与对照组水平之间未见统计学差异(p>0.05)。纳米SiO<,2>组肝脏细胞内8-OHdG阳性细胞数显著高于相同剂量微米SiO<,2>组水平(p<0.05)。 结论 1、纳米SiO<,2>与微米SiO<,2>可以引起小鼠肝脏和肺脏的DNA氧化损伤； 2、纳米SiO<,2>与微米SiO<,2>对引起的小鼠肝肺组织的DNA氧化损伤程度之间存在差异。

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