松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)谷氨酸氯离子通道基因克隆及分析

声明

摘要

1 文献综述

1．1 松材线虫研究现状

1．1．1 松材线虫形态性状及生活史

1．1．2 松材线虫病的危害与防治

1．2 离子通道研究进展

1．2．1 离子通道研究史

1．2．2 离子通道的特性及分类

1．2．3 谷氨酸氯离子通道的研究进展

1．3 膜片钳技术

1．4 电压钳技术

1．5 论文研究思路

2 材料与方法

2．1 试验材料

2．1．1 供试松材线虫

2．1．2 菌株及质粒

2．1．3 供试细胞

2．1．4 主要试剂

2．1．5 主要仪器设备

2．1．6 常用培养基及储备液

2．1．7 主要数据分析软件

2．1．8 引物和测序

2．2 试验方法

2．2．1 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因的克隆

2．2．2 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因功能验证

3 结果与分析

3．1 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因克隆

3．1．1 松材线虫总RNA的提取结果

3．1．2 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因片段的扩增结果

3．2 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因的生物信息学分析

3．2．1 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因的cDNA测序结果及推测的氨基酸序列

3．2．2 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因氨基酸序列理化性质和亲水性分析

3．2．3 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因编码蛋白结构域分析

3．2．5 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因编码蛋白三级结构预测

3．3 松材线虫谷氨酸氯离子通道基因表达载体构建

3．1．1 松材线虫谷氨酸氯离子通道表达载体构建图

3．3．2 载体片段的扩增结果

3．3．3 目的基因的扩增结果

3．4 细胞转染

3．5 全细胞膜片钳试验

3．6 双电及电压钳试验

4 讨论

4．1 外源表达细胞的选择

4．2 基因功能的验证

5 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

个人简介

致谢