微流控芯片单细胞克隆形成实验用于乳腺癌干细胞靶向药物筛选

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目的：利用肿瘤干细胞（Cancer Stem Cells,CSCs）的单细胞克隆形成特性，发展基于微流控芯片单细胞克隆形成实验的乳腺癌干细胞靶向药物筛选方法。　　方法：研究设计并加工了一种具有3840单细胞捕获微池阵列的微流控芯片，并考察了其单细胞操控效果。实验选用MCF-7、MDA-MB-231及T47D三种乳腺癌细胞系，在微流控芯片上完成了单细胞阵列构建、长期（14天）细胞培养、原位荧光呈像分析以及细胞药物作用实验。实验分别使用紫杉醇、阿霉素、硫链丝菌素和盐霉素作用于芯片单细胞阵列，根据单细胞克隆形成实验结果评价药物对CSCs的选择性杀伤作用。　　结果：在优化的条件下，芯片单细胞捕获效率达54.2%，相应的单次测试单个肿瘤细胞数量超过2000。捕获前后细胞直径分布检测结果提示，芯片单细胞捕获没有尺寸选择性。紫杉醇和阿霉素显示了部分单细胞克隆形成抑制效应，两种药物处理后MDA-MB-231单细胞成瘤抑制率为39.10%和32.35%，对MCF-7细胞抑制率为16.77%和14.79%。硫链丝菌素和盐霉素显示了完全的单细胞克隆形成抑制效应，其中硫链丝菌素对MDA-MB-231和MCF-7细胞的单细胞成瘤抑制率为100%和96.41%，盐霉素的抑制率为100%和100%。　　结论：研究发展了一种基于微流控芯片单细胞克隆形成实验的乳腺癌干细胞靶向药物筛选方法。这种芯片方法能够高效构建单细胞阵列并以集成化的方式完成整个分析过程。研究确认了微流控芯片单细胞克隆形成实验的乳腺癌干细胞靶向药物筛选能力。实验结果显示，肿瘤干细胞靶向药物可以完全地抑制单细胞克隆形成，而非靶向药物的抑制效应则是部分的。这种微流控芯片单细胞分析技术具有操作简便、分析高效的优势，因而是CSCs靶向药物筛选的有力工具。

著录项

作者
李佩文;
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作者单位

广州医科大学;

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授予单位广州医科大学;
学科临床检验诊断学
授予学位硕士
导师姓名徐邦牢;
年度 2018
页码
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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类
关键词
乳腺癌,肿瘤干细胞,靶向药物筛选,抑制效应;

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