跨膜蛋白PSGL-1的跨膜区相互作用的分子机制研究

声明

摘要

符号说明

第一章 绪论

1．1 跨膜蛋白简介

1．2 PSGL-1简介

1．3 跨膜蛋白相互作用模型

1．3．1 GlycophorinA(GPA)和GxxxG motif

1．3．2 极性氨基酸序列

1．3．3 亮氨酸拉链

1．4 影响跨膜蛋白相互作用的重要因素

1．4．1 跨膜区氨基酸序列的长度和位置

1．4．2 极性残基

1．4．3 芳香族氨基酸

1．4．4 带正电残基

1．5 跨膜蛋白相互作用的常用实验检测手段

1．5．1 TOXCAT体系

1．5．2 荧光共振能量转移

1．5．3 色氨酸诱导淬灭(TrIQ)方法

1．6 计算机模拟法表征跨膜蛋白之间的相互作用

1．7 跨膜短肽的应用

1．8 选题的意义及课题的主要内容

1．8．1 选题的意义

1．8．2 课题的主要内容

第二章 跨膜区长度对跨膜蛋白相互作用的影响

2．1 引言

2．2 实验部分

2．2．1 实验仪器与材料

2．2．2 TOXCAT载体的构建

2．2．3 感受态细胞MM39的制备

2．2．4 转化

2．2．5 菌落PCR

2．2．6 CAT活性测定

2．2．7 MalE互补实验

2．2．8 Western blot实验

2．3 实验结果与讨论

2．3．2 PSGL-1跨膜区的野生型TOXCAT载体单克隆验证

2．3．3 PSGL-1不同长度跨膜区的TOXCAT载体测序结果

2．3．4 不同长度跨膜区的CAT活性测定

2．3．5 不同长度跨膜区的MalE互补实验结果

2．3．6 不同长度跨膜区的Western blot实验结果

2．4 本章小结

第三章 亮氨酸拉链模型对跨膜蛋白相互作用的影响

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 实验仪器与材料

3．2．2 TOXCAT突变体引物设计

3．2．3 定点突变

3．3 结果与讨论

3．3．1 PSGL-1跨膜区定点突变结果

3．3．2 亮氨酸扫描突变

3．3．3 丙氨酸扫描突变

3．3．4 突变体MalE互补实验结果

3．3．5 突变体Western blot实验结果

3．4 本章小结

第四章 PSGL-1跨膜区相互作用的分子动力学模拟

4．1 引言

4．2 模拟体系构建和参数设定

4．3 实验结果与讨论

4．3．1 PSGL-1-TM野生型在DPPC膜中相互作用的粗粒化模拟

4．3．2 PSGL-1-TM突变体在DPPC膜中相互作用的粗粒化模拟

4．4 本章小结

第五章 结论与展望

参考文献

致谢

研究成果及发表的学术论文

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