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针对HPVE6/E7区的检测技术以及HPV分型检测在子宫颈癌筛查和分流中的应用研究

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目录

中英文缩略词

摘要

前言

1、总体目标

2、阶段目标

材料与方法

1 研究设计

2 研究对象的选择

2.1研究对象的纳入排除标准

2.2检验效能的估计

3 研究流程

3.1筛查妇女的研究流程

3.2医院门诊病人的研究流程

4 实验室检测

4.1 BD Ondarity HPV DNA检测

4.2 cobas 4800 HPV DNA检测

4.3 Aptima HPV mRNA检测和Aptima HPV 16/18/45 mRNA分型检测

4.4 OncoE6 HPV 16/18癌蛋白检测

4.5液基细胞学检查

4.6 p16/Ki-67双染细胞学检查

5 临床诊断

5.1 阴道镜检查及组织活检

5.2子宫颈组织切片p16和PR蛋白免疫组织化学染色

5.3组织病理学诊断

6 数据录入和统计学分析

研究结果

1.HPV DNA、mRNA和E6癌蛋白在宫颈癌筛查中的应用

1.1研究对象的选择及基本人口学特

1.2 HPV DNA、mRNA和E6癌蛋白在不同病理级别中阳性率比较

1.3三种检测指标间的关系

1.4三种检测指标与子宫颈癌及癌前病变的相关性

1.5 HPV DNA(Ondarity)、mRNA(APTIMA)和E6癌蛋白(OncoE6)检测指标在子宫颈癌筛查和分流中的应用研究

2.HPV分型检测联合p16/Ki-67在HPV阳性人群中分流的应用

2.2研究对象的基本人口学特征

2.3 p16/Ki-67在不同HPV型别风险等级和病理级别中的阳性率分布

2.4 p16/Ki-67对不同HPV型别风险等级的分层作用

2.5 HPV分型检测与p16/Ki-67联合在HPV阳性人群中分流的临床应用效果评价

3.HPV分型检测在细胞学诊断为ASC-US和LSIL的女性中分流的应用

3.2研究对象的基本特征

3.3 HPV型别阳性率及其风险

3.4 HPV分型检测对细胞学ASC-US和LSIL妇女分流作用的临床应用效果评估

讨论

1.HPV DNA、mRNA和E6癌蛋白在子宫颈癌筛查中的应用

1.1 DNA、mRNA和E6癌蛋白间的相互关系及其与子宫颈癌及癌前病变的相关性

1.2 DNA、mRNA和E6癌蛋白在子宫颈癌筛查中的应用

1.3研究优势与不足

1.4小结

2.1 HPV分型检测与p16/Ki-67的风险分层作用

2.2 RPV分型检测与p16/Ki-67在HPV阳性人群中分流的应用效果评价

2.3研宄的优势与不足

2.4小结

3.2 HPV分型检测在ASC-US和LSIL妇女中分流的临床应用效果评价

3.3研究的优势与不足

3.4小结

全文总结

参考文献

论文综述 子宫颈癌预防研究现状

个人简历

致谢

声明

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摘要

目标: 探索针对E6/E7区检测HPV DNA、mRNA、癌蛋白等几种分子标志物间的关系并评价其在子宫颈癌筛查分流中单独或联合应用的临床效果;探索p16/Ki-67和HPV分型检测在子宫颈癌筛查及分流中的应用,为优化中国妇女子宫颈癌筛查及分流策略提供科学依据。 材料与方法: 采用病例富集研究设计,2014年4月-2015年3月,在5家研究中心,分别从参加子宫颈癌筛查的正常妇女和在医院妇科门诊就诊的病人中入组了1967位研究对象。参加筛查的正常妇女每人取两份子宫颈棉签标本和一份液基细胞学标本用于HPV DNA检测(cobas4800HPV检测,罗氏诊断)、HPV16/18E6癌蛋白检测(OncoE6,AVC)、p16/Ki-67双染细胞学(CINtec PLUS,罗氏诊断)和薄层液基细胞学检查,以上四种检测任一阳性召回阴道镜并取活检;在医院门诊就诊的病人由当地医院诊断为CIN2+且符合入组标准的妇女,在治疗前取子宫颈标本用于以上四项检测,检测剩余标本冻存于超低温冰箱。2016年,使用留存标本进行HPV DNA检测(Onclarity HPV扩展分型检测,BD)、HPV mRNA和HPV16/18/45mRNA检测(Aptima和Aptima分型检测,豪洛捷)。 结果: 1.HPV DNA、mRNA和E6癌蛋白在宫颈癌筛查中的应用:(1)HPVDNA的阳性率和HPV mRNA的阳性率均高于E6癌蛋白检测,DNA和mRNA检测的一致性较好,核酸检测与E6癌蛋白检测间的一致性随着病变等级的增加而有所提高;(2)E6癌蛋白表达与病毒载量呈正相关(P=0.000),E6癌蛋白表达强度与mRNA检测信号强度不相关(P=0.940)。随着DNA病毒载量的升高和E6癌蛋白表达量的增加,子宫颈病变越来越严重(P=0.001);(3)HPVDNA检测和HPV mRNA检测对检出CIN2/3+的临床灵敏度均较高,E6癌蛋白对检出CIN2/3+的临床灵敏度较低但特异度较高。在HPV DNA或mRNA初筛阳性人群中,E6癌蛋白对检出CIN2/3+可提供较高的特异度和阳性预测值,对检出子宫颈癌可提供较好的灵敏度、特异度和阳性预测值,且能够有效降低阴道镜转诊率。 2.HPV分型检测联合p16/Ki-67在HPV阳性人群中分流的应用:(1)HPV16/18随着子宫颈病变的加重阳性率升高趋势。HPV31/33/58/52主要分布在CIN2中,HPV45/59/56/66和HPV51/39/68/35主要分布在CIN1中。p16/Ki-67阳性率随病变程度的增加呈升高趋势(Ptrend=0.000)。随着HPV型别风险等级的降低,p16/Ki-67的检出率降低(Ptrend=0.000);(2)p16/Ki-67对HPV31/33/58/52和HPV45/59/56/66两组阳性的妇女可达到较好的风险分层作用:在HPV31/33/58/52和HPV45/59/56/66阳性的妇女中,p16/Ki-67阳性检出CIN2+的风险显著高于p16/Ki-67阴性的风险;(3)与p16/Ki-67直接分流14种高危型HPV阳性妇女相比,HPV16/18阳性直接转诊p16/Ki-67分流8种高危型HPV的分流方法可显著提高灵敏度和AUC。HPV16/18联合p16/Ki-67分流其他12种高危型HPV或分流其他8种高危型HPV的总体临床应用效果差别无统计学意义,后者可有效降低阴道镜转诊率。 3.HPV分型检测在细胞学诊断为ASC-US(不能明确意义的不典型鳞状细胞)和LSIL(低度鳞状上皮内瘤变)的女性中分流的应用:(1)与ASC-US HPV阴性相比,ASC-US HPV16、45、18、52、33/58、31、39/68/35阳性和LSIL HPV31、16、39/68/35、45、33/58、51、18阳性对检出CIN2+的风险显著提高;(2)在ASC-US妇女中,当HPV16、45、18、52、33/58、31/39/68/35等型别阳性转诊阴道镜,临床灵敏度达到最大值,AUC也达到最大值为0.746。LSIL妇女中,当HPV16、31、39/68/35、45、33/58、51、18等型别纳入时可达到较好的临床应用效果,并降低阴道镜转诊率。 结论: 1.HPV DNA和mRNA两种核酸检测临床应用效果相似。E6癌蛋白不仅可作为初筛阳性分流的方法,还可作为鉴别子宫颈癌的重要指标; 2.在HPV31/33/58/52和HPV45/59/56/66等型别阳性的妇女中,p16/Ki-67可进一步对CIN2+和CIN3+的检出风险进行分层。在HPV初筛阳性人群中,HPV16/18阳性直接转诊阴道镜p16/Ki-67分流以上8种HPV阳性妇女是一种有潜在应用价值的分流方法; 3.在细胞学ASC-US中,对HPV16、18、45、52、33/58、31、39/68/35阳性的妇女进行阴道镜转诊;在细胞学LSIL中,对HPV16、31、39/68/35、45、33/58、51、18型阳性的妇女进行阴道镜转诊。未来尚需大规模人群队列研究来证实扩展分型检测在细胞学轻度病变中分流的应用价值。

著录项

  • 作者

    姜明月;

  • 作者单位

    北京协和医学院;

    中国医学科学院;

    清华大学医学部;

    北京协和医学院中国医学科学院;

  • 授予单位 北京协和医学院;中国医学科学院;清华大学医学部;北京协和医学院中国医学科学院;
  • 学科 流行病与卫生统计学
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 乔友林;
  • 年度 2018
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 肿瘤学;妇产科学;
  • 关键词

    检测技术; HPV分型; 宫颈癌筛查; 分流;

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