摘要
前言
实验材料
实验方法
1 常用的分子生物学方法
2．RNA制备和cDNA合成
3．蛋白表达及纯化
4 重组蛋白的内毒素去除方法及检测
5 蛋白质浓度测定
6．蛋白检测技术
7．酮式-烯醇式互变异构酶活性测定
8．细胞生物学方法
9．细胞凋亡检测
10．约氏疟原虫培养策略
11．小鼠实验
12．电子显微镜观察样品制备
13 流式细胞仪检测和分选
14．PyMIF敲除质粒构建和转染过程中用到的实验方法
15．transwell细胞迁移实验
实验结果
第一部分：PMIF在致死型约氏疟原虫(Py17XL)感染免疫中的功能探索实验总体技术路线
一、Py17XL MIF-KO和MIF-GFP虫株的制备
二、PyMIF不影响约氏疟原虫红内期生长
三、PyMIF在红内期约氏疟原虫中定位于虫体胞质内
四、PyMIF促进宿主炎症因子的分泌
五、PyMIF通过促进CD11b+Ly6c+细胞向脾脏迁移以促炎
六、PyMIF在体外对CD11b+Ly6c+细胞有趋化作用
第二部分：PMIF在非致死型约氏疟原虫(Py17XNL)感染免疫中功能的初步探索
1、Py17XNL虫株感染小鼠虫血率及PMIF表达变化分析
2、Py17XNL MIF-KO虫株的制备
3、17XNL MIF-KO与WT虫株感染Balb／c小鼠基本指标检测的比较
讨论
结论
参考文献
综述
附录Ⅰ 本论文使用的英文缩略语
附录Ⅱ：直博期间发表的文章和参加的会议
致谢
声明
北京协和医学院;
中国医学科学院;
清华大学医学部;
北京协和医学院中国医学科学院;
