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has-miR-125a-5p在胰腺癌中表达及功能的初步验证及新型肿瘤标志物HAb18G/CD147在胰腺神经内分泌肿瘤中表达的研究

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第一部分 胰腺癌外周血miRNAs表达谱的建立及hsa-miR-125a-5p在胰腺癌中的表达及功能的初步验证

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 新型肿瘤标志物HAb18G／CD147在胰腺神经内分泌肿瘤中表达的研究

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

综述

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摘要

一、胰腺癌外周血miRNAs表达谱的建立及hsa-miR-125a-5p在胰腺癌中的表达及功能的初步验证
　　 胰腺癌是一种恶性程度高、预后极差的消化系统恶性肿瘤,5年生存率约为6％。因胰腺癌发病隐匿,早期诊断率低,大约95％的胰腺癌患者在明确诊断时已进入中晚期,是导致其高死亡率的主要原因。因此急需寻找一种可以用于胰腺癌早期诊断的标志物。MicroRNAs(miRNAs)是近年来发现的一类长约18-25个核苷酸的内源性非编码单链小RNA分子。最新的研究结果显示,循环miRNAs尤其是外周血中的miRNAs稳定表达,其表达谱在疾病状态下出现异常改变,可能成为潜在的疾病检测评估指标及治疗靶点。本研究应用TaqMan MicroRNA Open Array技术筛选胰腺癌患者外周血中差异表达的miRNAs,与对照组比较,其中上调的有20个,下调的有63个。结合课题组前期胰腺癌组织芯片筛选的miRNAs数据,选择差异表达结果一致、同时在胰腺癌患者外周血和组织中均高表达的hsa-miR-125a-5p作为进一步研究对象,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用机制。hsa-miR-125a-5p在胰腺癌组织及细胞系中高表达,转染hsa-miR-125a-5p抑制剂(inhibitor)后,胰腺癌细胞Panc-1和MIA PaCa-2的生长受到抑制,集落形成能力下降,细胞周期受到阻滞,凋亡比例增加。提示hsa-miR-125a-5p在胰腺癌中发挥癌基因的作用,有可能成为胰腺癌早期诊断的血清学标志物及治疗靶点。
　　 二、新型肿瘤标志物HAb18G/CD147在胰腺神经内分泌肿瘤中表达的研究胰腺神经内分泌肿瘤(PNENs)占所有胰腺肿瘤的1％～2％,检查方法包括血清标志物、影像学等,而病理诊断是确诊PNENs的唯一方法。病理诊断有赖于形态学及免疫组化,免疫组化常用抗体包括一般神经内分泌标志物以及各种功能性肽类激素,这些抗体仅仅是对明确肿瘤的神经内分泌性质及功能状态有帮忙,不能对疾病的严重程度及预后起到提示作用。对PNENs进行组织学分级可以提示疾病的严重程度及预后,目前使用的方法包括计数核分裂像数和(或)Ki-67增殖指数,繁杂且费时费力,因些急需寻找一种在PNENs阳性表达且判读方便,又能提示肿瘤严重程度及预后的标志物。HAb18G/CD147是近年来新发现的一种跨膜糖蛋白,属免疫球蛋白超家庭成员。研究表明,HAb18G/CD147在上皮来源的肿瘤中高表达并提示不良的预后,而在相应的正常组织几乎不表达,其在肿瘤生长、浸润和转移中的作用已成为目前研究的热点。我们在研究中发现,HAb18 G/CD147在PNENs组织中呈高表达,而正常胰岛中不表达。HAb18 G/CD147在PNENs细胞中的免疫表型与肿瘤的组织学级别有关,可表现为浆型、膜型和膜浆型,膜型和膜浆型可能提示肿瘤分化差、恶性程度高。HAb18G/CD147在PNENs中的表达水平与肿瘤是否发生远处转移有关,与肿瘤大小、组织学级别、pTNM分期呈正相关性。HAb18G/CD147可能作为评估PNENs严重程度及预后的一个指标,为PNENs的诊断提供新的思路,有潜在的临床应用价值。

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