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应用iTRAQ技术研究周围神经感觉和运动束Wallerian变性前后的差异表达蛋白

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声明

摘要

前言

实验一:大鼠股神经肌支和隐神经Wallerian变性前后的差异蛋白质筛选

第1节:大鼠股神经肌支和隐神经损伤模型的建立

前言

材料与方法

结果

第2节:应用iTRAQ技术筛选大鼠股神经肌支和隐神经Wallerian变性前后的差异表达蛋白

前言

材料与方法

结果

实验二:大鼠脊髓腹侧神经根和背侧神经根Wallerian前后的差异蛋白质筛选

第1节:大鼠脊髓腹侧神经根和背侧神经根损伤模型的建立

前言

材料与方法

结果

第2节:应用iTRAQ技术的筛选大鼠脊髓腹侧神经根和背侧神经根Wallerian变性前后的差异表达蛋白

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述 周围神经Wallerian变性的研究进展

攻读学位期间发表文章情况

致谢

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摘要

目的:通过构建大鼠周围神经损伤模型,比较感觉和运动神经束Wallerian变性前后差异表达蛋白,筛选感觉和运动神经束特异表达蛋白为周围神经趋化性再生机制的研究提供依据。
  方法:选择成年雄性8周龄Wistar大鼠60只,分成3组,其中A、B两组分别行股神经横断模型(n=20)和神经根损伤模型(n=20)的建立,C组作为神经根损伤模型的正常对照组(n=20),股神经横断模型选择对侧正常神经作为对照。7d后各组分别进行取材,并应用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolutequantitation,同位素标记相对和绝对定量技术)联合LC-MS/MS(liquidchromatography-tandem mass spectrometry,液相色谱-串联质谱)对各组样本提取的蛋白进行同位素标记、质谱分析及差异蛋白的鉴定,应用DAVID(DAVIDBioinformatics Resources)对所鉴定出的差异蛋白进行GO(Gene ontology)功能和KEGG Pathway通路的富集,比较Wallerian变性后感觉和运动神经的差异表达蛋白,筛选与周围神经趋化性再生机制相关的蛋白。
  结果:(1)在股神经损伤模型中,共鉴定出3358个差异表达蛋白,其中股神经肌支Wallerian变性前后共鉴定出293个差异蛋白,隐神经变性前后共鉴定出417个差异蛋白,通过交集分析,肌支变性前后特异的差异蛋白有107个,隐神经变性前后特异的差异蛋白有231个。
  (2)在神经根损伤模型中,共鉴定出4312个差异表达蛋白,腹侧神经根变性前后共鉴定出637个差异蛋白,背侧神经根变性前后共鉴定出626个差异蛋白,通过交集分析,腹侧神经根变性前后特异的差异蛋白有195个,背侧神经根变性前后特异的差异蛋白有184个。
  结论:应用iTRAQ技术检测大鼠感觉和运动神经纤维变性前后表达差异蛋白,筛选感觉和运动神经变性后特异表达的蛋白,为周围神经趋化性再生的机制研究提供了依据。

著录项

  • 作者

    郭志远;

  • 作者单位

    解放军总医院;

    军医进修学院;

    中国人民解放军总医院;

    解放军医学院;

  • 授予单位 解放军总医院;军医进修学院;中国人民解放军总医院;解放军医学院;
  • 学科 外科学(骨科)
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 卢世璧,王玉,彭江;
  • 年度 2015
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 周围神经及神经节疾病;
  • 关键词

    iTRAQ技术; Wallerian变性; 周围神经损伤; 趋化性再生;

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