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ShcD通过PTB和SH2结构域和TrkC受体相互作用

         
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摘要

目的 探讨ShcD与TrkC的相互作用,以深入认识TrkC下游信号转导的分子机制.方法 利用酵母双杂交技术,将TrkC及TrkC各种突变体的胞内区分别克隆到酵母质粒pAS2-1中,将ShcD及ShcD的4个结构域(CH2、PTB、CH1和SH2结构域)分别克隆到酵母质粒pACT2中,将它们分别共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测它们之间的相互作用.将TrkC克隆进pmRFP载体(带红色荧光蛋白),ShcD克隆进pEGFP载体(带绿色荧光蛋白),并将pmRFP-TrkC和pEGFP-ShcD共转染至293T细胞中,采用荧光共聚焦显微镜观察其定位情况.结果 ShcD可以和TrkC但不能和激酶失活突变体TrkCM1(K572A)结合;PTB和SH2结构域均可以与TrkC受体结合并且PTB结构域结合于TrkC的 NPQY模体;ShcD和TrkC在293T细胞中共同定位于胞膜和胞浆中.结论 ShcD通过PTB和SH2结构域以依赖于受体激酶活性的方式结合TrkC.

著录项

  • 来源
    《中国医学科学院学报》 |2009年第6期|720-723797|共5页
  • 作者

    尤元刚; 李玮琦; 阴彬; 彭小忠;

  • 作者单位

    中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

    中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

    中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

    中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R34;
  • 关键词

    ShcD; TrkC; PTB; SH2; 共定位;

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