人凝血酶敏感蛋白1抗血管生成活性片段重组腺病毒高效制备

刘澎; 王一; 杨仁池; 顾洁; 蔡英林; 韩忠朝

首页> 中文期刊> 《中国医学科学院学报》 >人凝血酶敏感蛋白1抗血管生成活性片段重组腺病毒高效制备

人凝血酶敏感蛋白1抗血管生成活性片段重组腺病毒高效制备

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的构建人凝血酶敏感蛋白1(thrombospondin1,TSP1)抗血管生成片段重组腺病毒.方法采用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增编码TSP1抗血管生成活性片段(TSP1f)的cDNA序列,并将其克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV上,以线性化重组穿梭载体与超螺旋腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,进行同源重组并酶切鉴定筛选正确重组子,用线性化重组质粒转染人胚肾293细胞,制备重组腺病毒ADV-TSP1 f,最后以PCR及Western blot方法鉴定TSP1抗血管生成片段的表达.结果细菌内同源重组共获得43个卡那霉素抗性克隆,经酶切鉴定表明其中直径最小的10个均为正确重组子,该重组质粒转染293细胞所获得的重组腺病毒可高效表达TSP1抗血管生成片段,纯化后病毒滴度为1.0×1011 pfu/mL.结论细菌内同源重组法构建重组腺病毒高效快捷,所获得的ADV-TSP1f可进一步应用于抗肿瘤血管生成的基因治疗研究.

著录项

来源
《中国医学科学院学报》 |2003年第3期|312-315|共4页
作者
刘澎; 王一; 杨仁池; 顾洁; 蔡英林; 韩忠朝;
展开▼
作者单位

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津,300020;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类血管;肿瘤病理生理学;
关键词
凝血酶敏感蛋白1 AdEasy System 基因治疗腺病毒;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 细菌内同源重组法高效制备携带增强型绿色荧光蛋白与人内皮型一氧化氮合酶cDNA的重组腺病毒载体 [J] . 谭艳 ,王家宁 ,郭凌郧 . 郧阳医学院学报 . 2007,第2期
2. 重组凝血酶敏感蛋白-1N端片段对CD36表达阴性的ECV304细胞增殖的抑制 [J] . 王黎芳 ,周毓玲 ,顾洁 . 中国生物工程杂志 . 2006,第4期
3. 细菌内同源重组高效制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒载体 [J] . 罗燕 ,唐仕波 ,李湘 . 中国病理生理杂志 . 2002,第012期
4. 细菌内同源重组高效制备人突变p27基因重组腺病毒 [J] . 陈珺 ,徐少勇 ,邓长生 . 第四军医大学学报 . 2004,第005期
5. COS/TPC同源重组法高效制备人B7(CD80)重组腺病毒 [J] . 章卫平 ,曹雪涛 ,滨田洋文 . 中国肿瘤生物治疗杂志 . 1997,第1期
6. 细菌内重组法高效制备人Fas基因的重组体腺病毒 [C] . 鲁峰 ,高建华 . 中华医学会第七届全国整形外科学术会议 . 2003
7. 腺病毒介导重组人蛋白C及人神经生长因子Beta基因在兔乳腺中高效表达的研究 [A] . 肖波 . 2008

人凝血酶敏感蛋白1抗血管生成活性片段重组腺病毒高效制备

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅