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大肠癌组织中转化生长因子βⅡ型受体基因突变 RNA和蛋白表达的研究

         

摘要

目的 研究散发性大肠癌中TGF-βRⅡ在基因、RNA转录和蛋白表达水平上的改变 ,以及与临 床病理参数之间的关系,探讨TGF-βRⅡ基因突变在大肠癌发生、发展中的作用。方法 冷 冻切片,应用免疫组织化学方法检测40例正常粘膜、癌组织和10例癌旁组织TGF-βRⅡ蛋白 的表达。应用微解剖技术,分离提取30例正常和癌组织基因组DNA、PCR扩增,DNA测序,检 测TGF-βRⅡ基因第1~7外显子的突变。应用微解剖技术,分离提取5例有TGF-βRⅡ基因 突变的癌组织RNA,RT-PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳观察TGF-βRⅡ基因RNA的表达情况。结果 TGF-βRⅡ蛋白在正常粘膜、癌组织和癌旁组织中的表达率为85.0% 、10.0%、100%。癌组 织中TGF-βRⅡ蛋白表达水平与Dukes分期、淋巴结转移呈负相关。30例癌组织中共检出10 例 (33.3%)12处TGF-βRⅡ基因突变,其中9例TGF-βRⅡ蛋白失表达。随机抽取的5例有TGF - βRⅡ基因突变的病例中均未观察到RNA的表达。在正常和癌组织中,均见有第5外显子539密 码子处的变化(GCT→GTT)。结论 散发性大肠癌组织中存在着较高频率 的TGF-βRⅡ基因 突变,以第6和第7外显子的点突变为主,但在第3外显子的突变则以缺失为主。大肠癌组织 中TGF-βRⅡ基因突变,可能引起RNA失转录,进而导致TGF-βRⅡ蛋白失表达。大肠癌组 织 中有较高的TGF-βRⅡ蛋白失表达率,TGF-βRⅡ蛋白表达水平与Dukes分期、淋巴结转移 呈 负相关。在一定程度上TGF-βRⅡ蛋白可以作为一个潜在的大肠癌临床诊断和预后的分子指 标。TGF-βRⅡ基因第5外显子539密码子处出现GCT→GTT的改变,提示可能是中国人的单核 苷酸多态性。

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