克隆山羊成纤维细胞系的建立与生物学特性的研究

刘通; 王恒; 李运生; 张运海

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克隆山羊成纤维细胞系的建立与生物学特性的研究

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为研究克隆黄淮白山羊耳部皮肤成纤维细胞(cGSF)的体外培养及其生物学特性.通过组织块接种培养法和胰蛋白酶消化法均可以获得原代cGSF,但在接种培养24 h后,组织块法收获的细胞贴壁率和细胞量要明显高于胰酶消化法.就生长特征而言,cGSF的生长曲线也呈现典型“S”型,到达指数增长期、平台期的时间分别为第3,6天,早于普通黄淮白山羊的皮肤成纤维细胞(GSF),后者分别为第4,8天.cGSF原代(P0)、第2代(P2)、第8代(P8)细胞的染色体数目异常率均高于相同代数的GSF.在相同转染条件下,cGSF在转染pEGFP-N1后,再经G418筛选亦可形成克隆点,扩增获得阳性细胞系.总之,源自克隆山羊的体细胞体外生长、转基因后的生物学特征有别于普通动物分离得到的细胞系.因此,利用来自克隆动物的体细胞开展研究,选择分离培养、纯化、转基因方法时需要适当调整.

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来源
《华北农学报》 |2015年第5期|77-82|共6页
作者
刘通; 王恒; 李运生; 张运海;
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作者单位

安徽农业大学动物科技学院;

安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室;

安徽合肥230036;

安徽农业大学动物科技学院;

安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室;

安徽合肥230036;

安徽农业大学动物科技学院;

安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室;

安徽合肥230036;

安徽农业大学动物科技学院;

安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室;

安徽合肥230036;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;羊;
关键词
体细胞克隆; 山羊; 成纤维细胞; 生物学特性;

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