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T7噬菌体 p10融合蛋白表达及自组装 VLP 观察

         
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摘要

原核表达T7噬菌体p10融合蛋白， PCR扩增p10基因并在基因下游连接口蹄疫病毒（ FMDV） VP1抗原表位基因；将融合基因插入 pET－28a载体，构建重组质粒；用IPTG诱导重组菌表达目标蛋白，通过电镜观察病毒样颗粒（VLP）的形成。结果成功构建了pET－p10－VP1表达菌株。 SDS－PAGE、Western－blot 检测显示目标蛋白高效表达并与VP1特异性抗体产生免疫反应。回收p10－VP1蛋白样品经透射电镜观察，有40 nm VLP生成。表明 T7噬菌体 p10蛋白具有良好的VLP自组装功能，并可用于抗原表位的表面展示。%The prokaryotic expression of the fusion protein p10 from bacteriophage T7 was studied, and the formation of self-assembled virus-like particle( VLP) was observed under the electron microscope.The p10 gene was amplified through PCR,and it was linked to the VP 1 antigenic epitope gene in foot and mouth disease virus ( FMDV) .The fusion gene in downstream was in-serted into pET-28a vector to construct the recombinant plasmid , and IPTG was used to induce the recombinant bacteria express-ing target protein.The VLP formation was observed by electron microscopy.The results showed that the pET-p10-VP1 expression strain was constructed successfully.SDS-PAGE and Western-blot analysis showed the target protein was high-efficiently ex-pressed, and it generated an immune response to the VP 1 specific antibody.A 40-nm VLP was produced in the recovered p10-VP1 protein samples observed by transmission electron microscopy .The above results suggested that the fusion protein p10 from bacteriophage T7 could self-assemble VLP and could be used for the surface display of antigenic epitope .

著录项

  • 来源
    《江西农业学报》 |2017年第2期|14-17|共4页
  • 作者

    徐悦; 徐海; 鲍熹; 王义伟; 卢宇; 侯继波;

  • 作者单位

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

    江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心;

    江苏 南京 210014;

    江.苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

    江苏 扬州 225009;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程（遗传工程）;
  • 关键词

    T7噬菌体; 口蹄疫; 表达; VLP;

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