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以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA

         

摘要

为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法.该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得HMW DNA.经检测,来自200条根尖(10个胶块)的HMW DNA的浓度约为4~20 ng/μL,而连接、转化后的BAC克隆平均插入片段超过100 kb.证明该法适用于提取HMW DNA以构建BAC文库.

著录项

  • 来源
    《作物学报》 |2006年第12期|1920-1923|共4页
  • 作者单位

    西北农林科技大学农学院,陕西杨凌,712100;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

    新疆农业大学农学院,新疆乌鲁木齐,830052;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

    西北农林科技大学农学院,陕西杨凌,712100;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

    中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室,北京,100081;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 农作物;
  • 关键词

    高分子量DNA; 蔗糖密度梯度离心; 细胞周期同步化; 染色体流式分选; BAC;

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