多发性骨髓瘤细胞株ARH-77恶性相关基因hMMTAG2的克隆和序列分析

田菁燕; 胡维新; 田尔明; 石奕武; 申群喜; 汤立军; 江元山

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为从人类多发性骨髓瘤细胞株中克隆新的恶性相关基因, 构建人类多发性骨髓瘤细胞株ARH-77 cDNA文库. 从ARH-77细胞中提取mRNA并逆转录合成双链cDNA, 经PCR扩增后, 插入表达载体, 得到ARH-77细胞cDNA表达文库. 将文库菌落印迹至尼龙膜, 分区培养提取质粒DNA, 建立基因池, 并分别转染NIH/3T3细胞. 经G418筛选并计集落数, 选择克隆数最多的基因池进入第二轮. 如此反复进行. 通过测序, 排除所有已知的癌基因、抑瘤基因、细胞因子及其受体, 获得了有转化活性的cDNA克隆A62-17. 进一步使用RACE技术对5′端进行快速扩增, 获得全长为1300 bp的cDNA序列, 该基因由8个外显子组成, 编码产物为263个氨基酸组成的多肽链. 将该基因暂时命名为多发性骨髓瘤转化基因2 (tumor-associated gene 2 from human multiple myeloma, hMMTAG2). 该基因定位于人类染色体1q42.13. 生物信息学分析发现, hMMTAG2编码有多个蛋白激酶的磷酸化位点、N-肉豆蔻酸化位点及核定位信号, 提示该基因的表达产物可能是细胞核内的一种信号分子.

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来源
《生物化学与生物物理学报：英文版》 |2003年第2期|143-148|共6页
作者
田菁燕; 胡维新; 田尔明; 石奕武; 申群喜; 汤立军; 江元山;
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作者单位

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

University of Arkansas for Medical Sciences,Arkansas Cancer Research Center,Little Rock,AR 72205;

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙,410078;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肿瘤学;基因工程（遗传工程）;
关键词
多发性骨髓瘤; ARH-77细胞株; 基因克隆; 多发性骨髓瘤转化基因2(hMMTAG2);

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