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利用脱落酸和冷适应提高坛紫菜丝状体种质的冻存效率

         
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为验证脱落酸(ABA)和冷适应能否提高紫菜丝状体种质的冷冻保存效率,研究以坛紫菜(Pyropia haitanensis)自由丝状体为材料,在20℃,光强40μmol·photons/(m^(2)·s),在光周期12L﹕12D条件下以ABA(100μmol/L)处理48h或4℃暗培养6d,随后进行-80℃冷冻保存实验。通过连续测定冻存复苏后藻体的存活率及最大光量子效率F_(v)/F_(m),并利用Realtime qPCR技术检测藻体与抗冷相关基因[P(H^(+))-ATPase、ald、Mn-sod A、Cu/Znsod 1、apx-2、hsp70-4、psy-2、gapdh、gpxha-1]等的表达情况来评估预处理及冻存效果。结果显示:(1)ABA和冷适应均可提高坛紫菜丝状体的冷冻存活率,ABA组存活率可达59%,冷适应组存活率可达89%;(2)丝状体经冷适应后F_(v)/F_(m)恢复速率较其他组显著提高(P<0.05),复苏35d即可恢复至最佳生长状态;(3)ABA和冷适应显著上调了藻体P(H^(+))-ATPase、ald、Mn-sod A、Cu/Zn-sod 1、gapdh(P<0.01)和psy-2(P<0.05)基因的表达,apx-2和hsp70-4只有在ABA刺激时才表现为上调(P<0.01)。综上,ABA处理和冷适应均可改善坛紫菜丝状体的抗冻能力,提高超低温冷冻保存效率。4℃冷适应法操作简单,效果显著,具较大应用潜力。

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