中华鳖STING基因的克隆及功能分析

陈明; 周谢菲; 高建军; 朱庭耀; 彭佳诚; 徐海圣

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为了研究干扰素基因刺激因子STING在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,克隆了中华鳖STING基因(PsSTING)的cDNA序列,其全长为2145 bp,包含1152 bp的开放阅读框,编码383个氨基酸。氨基酸序列比对发现,PsSTING蛋白N端含有4个跨膜区和2个RXR内质网滞留基序,C端有1个解旋酶结构域。qRTPCR结果显示,PsSTING在中华鳖心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、小肠、胃、皮肤、肌肉和血细胞等组织中均能表达,其中在脾脏中的表达量最高,其次是肝脏、小肠和肺,而在血细胞中的表达量最低;用嗜水气单胞菌、LPS和poly(I:C)刺激后,PsSTING基因呈现出先上调后下调的趋势,在刺激12h时显著高于对照组(P<0.05),24h达到最高值,在48h后逐渐恢复到初始水平,其蛋白表达量在脾脏和小肠中明显增加。体内RNA干扰后,小肠中PsSTING的表达量显著下调(P<0.05),IFN信号通路中TBK1、IRF3、IRF7、STAT6和IFNβ等基因表达水平显著下调(P<0.05)。在HEK293T细胞中过表达PsSTING基因,能够显著激活pIFN-β-luc的启动子。研究结果表明PsSTING基因参与调控了中华鳖的先天免疫反应。

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来源
《水生生物学报》 |2022年第3期|324-331|共8页
作者
陈明; 周谢菲; 高建军; 朱庭耀; 彭佳诚; 徐海圣;
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作者单位

浙江大学动物科学学院;

菏泽学院单县分校;

浙江大学湖州市南太湖现代农业科技推广中心;

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正文语种 chi
中图分类 Q344.1;
关键词
干扰素基因刺激因子; 中华鳖; 先天免疫; 基因克隆; 功能;

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