TAT蛋白转导结构域介导融合蛋白在小鼠活体的跨膜递送作用

刘树滔; 何火聪; 陈菁; 傅蓉; 潘剑茹; 饶平凡

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TAT蛋白转导结构域介导融合蛋白在小鼠活体的跨膜递送作用

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目的探讨跨膜递送短肽--TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用.方法以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这两种含TAT的融合蛋白及作为对照的融合蛋白GST-GFP,一定时间作用后取体内器官和皮肤做冷冻切片,荧光显微镜检测这些融合蛋白的跨膜递送情况;并对分别融合在C端或者N端的TAT介导GFP在活体动物体内和皮肤的跨膜递送作用进行对比.结果腹腔注射实验结果表明,TAT可以介导不经过蛋白质的变性处理的融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜递送进入到小鼠的心脏、肝、肾、脾和肺,甚至脑组织;其中GST-GFP-TAT跨膜递送效率比GST-TAT-GFP更高.结构模拟分析提示GST-GFP-TAT与GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情况不同可能是造成两种蛋白跨膜递送活性差异的重要因素.皮肤实验的结果则表明TAT不仅介导融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT进入小鼠表皮,而且使其进入小鼠皮肤的真皮层.结论 TAT可以跨膜递送不经过变性处理的融合蛋白进入小鼠皮肤和体内,递送效率可能与TAT的暴露程度相关;这些结果为在蛋白质疗法方面应用TAT提供了进一步的理论依据.

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来源
《中国实验动物学报》 |2010年第6期|463-466后插3-后插4|共6页
作者
刘树滔; 何火聪; 陈菁; 傅蓉; 潘剑茹; 饶平凡;
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作者单位

福州大学生物工程研究所,福州350002;

福州大学生物工程研究所,福州350002;

福建省肿瘤医院放射生物学研究室,福州350014;

福州大学生物工程研究所,福州350002;

福州大学生物工程研究所,福州350002;

Neurology Department of Emory University,Atlanta,GA,30322,USA;

福州大学生物工程研究所,福州350002;

福州大学生物工程研究所,福州350002;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;细胞生理学;
关键词
TAT蛋白转导结构域; 融合蛋白; 跨膜递送; 皮肤; 器官;

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