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长链非编码RNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系中的表达及作用

         

摘要

cqvip:目的分析长链非编码RNA CCAT1(LncRNA CCAT1)在非小细胞肺癌细胞系中的表达及作用。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定非小细胞肺癌细胞系HCC827、H1650、H1299、A549及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中LncRNA CCAT1的表达;将A549细胞系分为CCAT1-siRNA组、CTR-siRNA组及Mock组,经LipofectamineTM3000分别转染pcDNA3.1-LncRNA-CCAT1-shRNA、pcDNA3.1-LncRNA-CCAT1-NC及空白质粒pcDNA3.1;MTT实验测定细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验测定细胞迁移、侵袭能力,qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验分别测定细胞中miR-152和成纤维细胞生长因子2(FGF2)蛋白表达水平。结果 LncRNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系HCC827、H1650、H1299、A549中的表达量高于BEAS-2B(均P<0.01)。MTT结果示,转染72及96 h后,CCAT1-siRNA组细胞增殖活力显著低于CTR-siRNA组和Mock组(均P<0.05)。CCAT1-siRNA组划痕愈合率低于CTR-siRNA组[(33.45±2.62)%vs.(52.73±4.17)%,P<0.05]。CCAT1-siRNA组侵袭细胞数少于CTR-siRNA组[(93.7±6.2)vs.(172.8±11.5),P<0.01)]。CCAT-siRNA组miR-152表达量高于CTR-siRNA组[(3.73±0.18)vs.(1.02±0.05),P<0.01)]。CCAT-siRNA组FGF2蛋白表达量低于CTR-siRNA组[(0.59±0.03)vs.(1.01±0.06),P<0.01)]。结论LncRNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系中高表达,LncRNA CCAT1沉默可抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与miR-152表达上调和FGF2表达下调有关。

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