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幽门螺杆菌Cag致病岛hp0523基因的缺失及其对CagA蛋白转运能力的影响

         

摘要

【目的】构建幽门螺杆菌Cag致病岛编码的hp0523基因缺失株,为研究hp0523基因的功能奠定基础。【方法】本研究利用同源重组原理,设计并扩增了hp0523基因上下游同源臂片段,构建hp0523基因缺失自杀质粒pBlueKM40-Δhp0523,电击转化进入幽门螺杆菌后,通过抗生素筛选后并经PCR验证无误后,获得hp0523基因缺失株H.pylori11637Δhp0523;采用幽门螺杆菌与胃癌上皮细胞BGC-823共培养后,分析该基因缺失前后对细胞毒性蛋白CagA转运能力的影响;并分析比较了缺失前后,CagA蛋白的表达能力变化;【结果】构建幽门螺杆菌hp0523基因缺失的自杀质粒,并成功获得一株hp0523基因缺失株;CagA转运实验表明,hp0523基因缺失后,可以导致细菌转运CagA蛋白的能力丧失;此外,还发现hp0523基因缺失可以影响CagA蛋白表达。【结论】成功获得了幽门螺杆菌hp0523基因缺失株,初步研究发现hp0523基因是幽门螺杆菌Cag致病岛中重要致病因子之一,参与CagA蛋白的转运,可能是其转运装置中组成成分之一。

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