谷氨酸棒杆菌10147基因组中启动子活性片段的克隆与分析

刘桂明; 赵智; 张英姿; 王宇; 丁久元

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谷氨酸棒杆菌10147基因组中启动子活性片段的克隆与分析

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【目的】获得谷氨酸棒杆菌10147基因组中具有启动子活性片段的结构序列,为构建表达载体做准备。【方法】利用启动子探测载体pAKC6,采用鸟枪法克隆经过限制性内切酶Sau3A I完全酶切的谷氨酸棒杆菌10147染色体DNA片段,并测定pAKC6上报告基因编码的氯霉素乙酰转移酶(CAT)的比活力,以筛选有启动子功能的片段。【结果】共克隆到30个具有启动子功能的片段。其中有3个插入片段启动的氯霉素乙酰转移酶比活力大于24 U/mg,插入片段F57启动的CAT比活力为32.50 U/mg;而插入有启动子Ptrc的阳性对照的CAT比活力为26.33 U/mg。【结论】获得3个DNA插入片段具有与已知启动子Ptrc相当的启动活性,这些片段可以用于构建谷氨酸棒杆菌表达载体。

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来源
《微生物学报》 |2009年第7期|972-977|共6页
作者
刘桂明; 赵智; 张英姿; 王宇; 丁久元;
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作者单位

中国科学院微生物研究所;

北京100101;

中国科学院研究生院;

北京100049;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学;基因工程（遗传工程）;
关键词
谷氨酸棒杆菌; 启动子探测载体; 启动子; 氯霉素乙酰转移酶;

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