猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌中的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定

徐义刚; 崔丽春; 葛俊伟; 赵丽丽; 李一经; 马广鹏; 唐丽杰

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将分别编码猪瘟病毒T细胞表位E290多肽和猪细小病毒主要保护性抗原VP2蛋白的重组基因插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2-E290,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白的乳酸菌共表达系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,对诱导表达的菌体及培养上清液进行SDS-PAGE检测表明,有约70kDa蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符.Western blot分析结果表明所表达的蛋白具有与天然病毒蛋白一样的抗原特异性.以诱导表达上清液作为抗原进行的间接ELISA实验也表明,重组的目的蛋白获得了分泌表达.将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品检测小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体,采集血液样本检测血清中抗PPV及抗E290的特异性IgG.结果表明分泌型的重组菌pPG-VP2-E290/L.casei 393免疫小鼠能够产生明显的抗体水平,为重组猪瘟与猪细小病毒乳酸菌口服活菌疫苗的研制奠定了重要的物质基础.

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来源
《微生物学报》 |2007年第4期|667-672|共6页
作者
徐义刚; 崔丽春; 葛俊伟; 赵丽丽; 李一经; 马广鹏; 唐丽杰;
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作者单位

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

东北林业大学,哈尔滨,150040;

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;微生物学;
关键词
猪瘟病毒; T细胞表位; 猪细小病毒; VP2蛋白; 干酪乳杆菌; 特异性抗体;

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