甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响

何秀萍; 郭雪娜; 张博润; 谭华荣

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甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响

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通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE2-1及仅含编码序列的DNA片段ARE2-2.分别以ARE2启动子,乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUPI启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌表达质粒pHX2,pHXA2和pHXC2.表达质粒分别转化酿酒酵母单倍体菌株YS58和以前通过细胞杂交构建的麦角甾醇高产菌株YEH56.通过营养缺陷互补和铜抗性筛选到转化子,质粒上的ARE2基因在YS58和YEH56中都实现了活性表达,使细胞内甾醇酯化水平升高,并导致细胞麦角甾醇含量的提高.对转化菌株的培养条件进行了初步研究,在优化条件下,重组转化菌株YEH56(pHX2)、YEH56(pHXA2)和YEH56(pHXC2)的麦角甾醇含量分别是受体菌YEH56的1.3、1.3和1.4倍.

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来源
《微生物学报》 |2004年第1期|67-71|共5页
作者
何秀萍; 郭雪娜; 张博润; 谭华荣;
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作者单位

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

中国科学院微生物研究所,北京,100080;

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正文语种 chi
中图分类微生物遗传学;
关键词
甾醇酰基转移酶; 基因表达; 麦角甾醇; 酵母工程菌;

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