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不对称PCR制备单链探针检测登革Ⅱ型病毒复制型RNA和复制中间体RNA

         

摘要

登革病毒是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒,病毒的复制过程发生在感染细胞胞浆,复制型(RF)RNA是病毒半保留复制的循环模板,复制中间体(RI)RNA的合成则是病毒复制所必需的.经RT-PCR获得的DNA模板进行不对称PCR扩增,当限制性引物终浓度为250nmol/L,两引物比例为100∶1时,即得到不对称PCR的预计单链和双链DNA产物.此单链产物用于标记探针进行核酸杂交.结果表明不对称PCR制备单链探针进行核酸杂交可用于检测病毒复制型RNA和复制中间体RNA的合成.

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