aroA基因的克隆和优化

何鸣; 曾海燕; 徐培林; 叶长明

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aroA基因的克隆和优化

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除草剂草甘膦 (glyphosate ,N_phosphonomethylglycine )的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP (5_烯醇式丙酮酰莽草酸_3_磷酸 ,5_enolpyruvylshikimate_3_phosphate)合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合成酶基因为模板 ,通过随机结合 ,交错延伸的PCR扩增过程 ,克服定点突变的局限性 ,使基因获得多位点突变 ,并使之在大肠杆菌中得到表达。对纯化后的表达产物的酶动力学性质的测定结果表明 ,获得了与作为模板的野生型相比 ,具有高得多的酶活力 (降低的Km (PEP) )和大大增强的草甘膦抗性 (升高的Ki(glyphosate) )

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来源
《中山大学学报：自然科学版（中英文）》 |2002年第2期|76-79|共4页
作者
何鸣; 曾海燕; 徐培林; 叶长明;
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作者单位

中山大学生物工程中心∥基因工程教育部重点实验室;

中山大学地球与环境科学学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类转化及克隆;植物基因工程;
关键词
5-稀醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸; EPSP合成酶; 草甘膦; 除草剂; 基因克隆; 基因优化; 转基因作物; aroA基因; 酶活力;

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