AGO和RDRP基因参与黄曲霉压力应激反应

刘翔; 杨碧; 田询; 周建鸿; 廖永慧; 刘玲玲; 禹文峰; 齐晓岚; 江银辉

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目的探究RNA干扰(RNAi)机制中Argonaute(Ago)基因和RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)基因在黄曲霉生长发育中的作用。方法利用同源重组的方法构建黄曲霉Ago1、Ago2、RDRP1、RDRP3基因突变菌株,接种106 CFU/mL孢子悬液3μl至马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养基上观察突变菌株的生长发育现象。在小量酵母提取物葡萄糖(YGM)培养基中加入200、400μg细胞壁压力试剂刚果红(CR),0.8 mol/L、1.6 mol/L渗透压药物氯化钠(NaCl),氧化压力试剂2 mmol/L、4 mmol/L过氧化氢(H 2O 2),基因组损伤剂0.01%、0.02%甲磺酸甲酯(MMS)试剂分析突变菌株的压力应激反应。结果成功构建黄曲霉突变菌株ΔAgo1、ΔAgo2、ΔRDRP1、ΔRDRP3且生长发育正常。ΔAgo1、ΔAgo2菌株相比对照可降低对细胞壁和渗透压的胁迫影响。Ago1基因缺失可降低H 2O 2的影响,相反RDRP3基因缺失,H 2O 2的抑制作用增加。ΔAgo2、ΔRDRP1菌株能降低对基因损伤剂的作用。此外,ΔRDRP1增加渗透压胁迫作用。结论黄曲霉Ago1、Ago2、RDRP1、RDRP3基因不参与生长速率和无性繁殖调控,可以参与调节宿主菌对环境的应激反应。

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来源
《安徽医科大学学报》 |2023年第9期|1442-1449|共8页
作者
刘翔; 杨碧; 田询; 周建鸿; 廖永慧; 刘玲玲; 禹文峰; 齐晓岚; 江银辉;
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作者单位

贵州医科大学分子生物学重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类曲菌;
关键词
黄曲霉; RNAI; 应激反应;

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