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靶向PDGF受体-α的RNA干扰对RPE细胞增殖和凋亡的影响

         

摘要

目的 探讨针对血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)的RNA干扰对体外培养的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和凋亡的影响,为临床治疗增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)提供实验依据.方法 利用脂质体将合成的shRNA转染体外培养的hRPE细胞,MTT法检测hRPE细胞增殖活性;RT-PCR法检测细胞中PDGFR-α mRNA的表达;Western blot法检测PDGFR-α蛋白表达水平;Hoechst 33258荧光染料核染分析细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率.结果 PDGFR-α shRNA作用hRPE细胞24 ~72 h后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间剂量效应(P<0.05);PDGFR-α shRNA作用hRPE细胞48 h后,实验组PDGFR-α基因mRNA和蛋白的表达水平较空白对照组及阴性对照组明显降低(P<0.05);实验组细胞的凋亡率分别为(37.10±0.55)%、(50.8±1.41)%,与空白对照组(11.7±1.11)%及阴性对照组(13.5±1.05)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);实验组G1期细胞百分比分别为(64.76±1.16)%、(75.64±0.93)%,与空白对照组(54.51±1.40)%及阴性对照组(56.04±2.19)%相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PDGFR-α shRNA能抑制hRPE细胞的增殖并诱导其凋亡.

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