目的 研究不同低氧时间培养下,人肺腺癌上皮A549细胞糖皮质激素受体α(GRα)和糖皮质激素受体β(GRβ)的表达.方法 将A549细胞分成6组,低氧组(3组)和对照组(3组),分别放置于低氧小室(37℃,95% N2,5% CO2)和普通培养箱中(37℃,95%空气,5% CO2)培养.24 h、48 h、72 h后收集细胞,运用倒置显微镜下拍摄照片、RT-PCR和免疫细胞化学方法观察缺氧对A549细胞数目、形态以及细胞内GRα、GRβ mRNA和蛋白表达的影响.结果 ①低氧组细胞形态发生显著改变,随着低氧时间的延长,细胞生长速度逐渐减慢,细胞肿胀变形逐渐加剧.②RT-PCR的结果显示:24 h GRα mRNA表达水平低氧组(0.914±0.079)与对照组(0.883±0.208)比较略有降低,但差异无显著性(P>0.05);48、72 h GRα mRNA表达水平低氧组(0.794±0.029、0.828±0.171)与对照组(1.054±0.120、1.187±0.173)比较显著降低,差异有显著性(P0.05).③免疫细胞化学的结果显示:24 h GRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变;48、72 h GRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较显著降低;24、48、72 h GRβ的蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变.结论 低氧可导致A549细胞GRα的mRNA和蛋白表达水平显著降低;低氧环境可能会影响糖皮质激素作用的发挥.
展开▼
