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人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达

         

摘要

目的 构建人胰高血糖素样肽-1突变体(2Gly-hGLP-1)基因,并表达GST2-Gly-hGLP-1.方法 用限制性内切酶双酶切载有hGLP cDNA的重组克隆质粒PMD18T simple和原核表达质粒pGEX-4T-1,将GLP-1定向插入原核表达载体pGEX-4T-1+中,筛选出阳性克隆.在获得重组hGLP-1基因工程菌的基础上,利用定向突变的技术改造其第2位丙氨酸为甘氨酸,经酶切克隆于pGEX-4T-1+中,构建pGEX-4T-1+/2Gly-hGLP-1表达载体.转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达.结果 经测序分析,证明2Gly-hGLP-1已经克隆到pGEX-4T-1+中.Western blot证实,该蛋白可被特异性hGLP-1识别.结论 成功构建和表达了人胰高血糖素样肽-1突变体原核表达质粒.

著录项

  • 来源
    《安徽医科大学学报》 |2006年第6期|632-635|共4页
  • 作者单位

    安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科,合肥,230022;

    安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科,合肥,230022;

    安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科,合肥,230022;

    安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科,合肥,230022;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R349.83;
  • 关键词

    胰高血糖素/遗传学; 基因表达;

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